Chromatographie

1 LA LACTATE DESHYDROGENASE: PURIHCATION PARTIELLE PAR CHROMATOGRAPHIE D'AFFINITÉ La lactate deshydrogénase catalyse la réaction: L lactate + NAD+ < - > pyruvate + NADH +H+ La lactate deshydrogénase (LDH) est un tétramère constitué de quatre sous-unités de 35 kDa. Chez les mammifères deux types différents de sous-unité existent, le type* M (pour muscle) et le type H (pour heart), ce qui correspond à cinq formes d' isoenzymes tétramériques: MH3, H4 M4, M3H, Bien que ces formes

Lactate déshydrogénase : purification partielle par chromatographie d'affinité La lactate déshydrogénase (LDH) est une enzyme présente dans une grande diversité d'organismes, aussi bien végétaux qu'animaux. Elle catalyse la conversion réciproque de la pyruvate et de la lactate accompagnée de la conversion concomitante du NADH en NAD+ (et inversement). Ce tétramère est composé de 4 sous unité (isoenzyme) différents de par leurs constance cinétiques et leurs pH isoélectriques. Le but de ce TP

TP CHIMIE IDENTIFICATION D’ESPECES CHIMIQUES LA CHROMATOGRAPHIE (CCM) I/Principe et technique de la chromatographie 1. Obtention d'un chromatogramme On utilise une plaque à chromatographie. Elle est constituée par exemple d'une plaque de plastique ou d'aluminium sur laquelle est déposée une mince couche de gel de silice. Il peut aussi s'agir d'une simple feuille de papier. Le gel de silice constitue la phase fixe (ou stationnaire). On y trace, à quelque distance du bord inférieur, une ligne

d’œuf en les mélangeant à une solution organique. Nous avons ensuite prélevé le surnageant de cette solution correspondant aux lipides en prenant en compte les différences de solubilité. Enfin nous avons fait migrer ce surnageant lors de deux chromatographies sur couche mince de silice afin de séparer et d’identifier les différents lipides. PRINCIPE 1/ Tout d’abord nous avons effectué l’extraction des différents constituants lipidiques du jaune d’œuf grâce à un solvant d’extraction. On prélève

Applications de la Chromatographie d’ xclusion E Stérique à la caractérisation de systèmes macromoléculaires au sein de l’ unité mixte CNRS-bioMérieux CNRSCatherine Ladavière, Ladavière Bertrand de Lambert, Carole Chaix, Marie-Thérèse Charreyre, Thierry Delair, Christian Pichot Système macromoléculaire et Immuno-virologie Humaine UMR 2142 Ecole Normale Supérieure de Lyon 46, allée d'Italie 69364 Lyon http://www.ens-lyon.fr/CNRS-bioMerieux • A propos de Polymères… • Chromatographie d’ Exclusion

n’est pas le cas des chlorophylles et caroténoïdes. Pour cet atelier, on les extrait dans un tampon phosphate dont le rôle est de simplement stabiliser les pigment. Par contre, les pigments solubles dans les solvants organiques sont séparés par chromatographie sur silice, grâce au fait qu’ils ont des polarités différentes dans ces solvants (éther de pétrole, acétone, etc). Les organismes utilisés seront des plantes utilisées comme points de comparaison (épinards et carottes) et des cultures de cyanobactéries

mesure de sa température de fusion : si le produit ne fond pas à la température attendue soit ce n’est pas l’espèce chimique attendue soit il n’est pas pur. CCM (Chromatographie sur Couche Mince) : technique de séparation et d’identification d’espèces chimiques : l’éluant en montant le long de la phase stationnaire (plaque à chromatographie) entraîne avec lui les différentes espèces chimiques. Chaque espèce chimique va se lier plus ou moins bien avec l’éluant et donc migrer à une hauteur plus ou moins

n°1/2/3 Chimie : 2nde 1/4 II. La chromatographie 1. Principe de la chromatographie : voir TP.4 La chromatographie est une méthode physique de séparation et d’identification des constituants d’un mélange. Pour réaliser une chromatographie sur couche mince C.C.M, il faut :  Un éluant appelé phase mobile  Un support solide appelé phase fixe  Des échantillons de référence  Les échantillons à analyser  La cuve à chromatographie Au cours de la chromatographie, l’éluant migre par capillarité le long

Biochimie – Biologie Moléculaire Année 2012 - 2013 Rapport de Travaux Pratiques Présenté par MAKOWSKAYA Anna PURIFICATION EN UNE ETAPE DE LA L-ASPARTATE AMMONIA-LYASE D’HELICOBACTER PYLORI PAR CHROMATOGRAPHIE D’AFFINITE ET ETABLISSEMENT DU BILAN DE PURIFICATION Résumé Communément appelée aspartase (L-Aspartate ammonia lyase), l’AAL fait partie de la famille des lyases (EC 4.3.1.1). Elle catalyse la

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