Protéine fluorescente verte

INTRODUCTION 1) La cellule Toutes les cellules sont faites de macromolécules (dont l’ADN et l’ARN et en grande majorité des protéines) constituées des mêmes éléments chimiques : C, H, O, N et Fe. La cellule est l’unité d’organisation du vivant. Il y a 2 types de cellules: les procaryotes et les eucaryotes.            a) La cellule procaryote (ex: bactérie) Se divise par défaut Toujours unicellulaire Pas de compartiment nucléaire (ADN diffus car pas de noyau) Pas d’organites Traduction

biotechnologie pour la créa)on de lignées cellulaires immortalisées c’est-à-dire capables de se mul)plier en culture indéfiniment. Son pouvoir immortalisant est lié à l’expression de plusieurs protéines dont l’une est appe- lée Protéine « Grand T ». Afin de comprendre le mode d’ac)on de Grand T, des expériences

code jeu…EchelleCaractéristiques des individus maladesOrganismeorganesCellule: Molécule (protéine CFTR):EchelleCaractéristiques des individus maladesOrganismeDifficultés respi car mucus très épais et infections bactériennes pb du fonctionnement du foie et du pancréas peau: sueur très saléeorganesBronches: mucus à l’intérieurCellule: pas de canaux Cl- sur la membrane plasmiqueMolécule (protéine CFTR):Protéine anormale: ne peut pas jouer le rôle de canal: il y a une faible quantité d’ions chlorure

Clonage du gène ESR1 dans le vecteur plasmidique pGFP pour obtenir la protéine fusion (GFP-ERα) I-But : Le but des toute ces séances de TP sont de rétablir via un vecteur d’expression, l’expression de la protéine Erα (récepteur des oestrogènes) dans la lignée cellulaire de carcinome mammaire (MD1-MB-231) Le but plus particulièrement des deux premières séances de TP est de cloner le gène ESR1 dans un plasmide pour faire une protéine de fusion et de vérifier si ce clonage a fonctionné. II-Principe

consiste à utilisé un anticorps qui agit contre l’antigène. L’anticorps est alors couplé à un fluorochrome qui fait en sorte que l’immunoglobuline devient fluorescente. Lorsque le complexe antigène-anticorps se forme il est fluorescent cela permet de mieux visualiser le complexe. L’immunofluorescence indirecte c’est lorsque l’anticorps qui est fluorescent n’est pas spécifique à l’antigène, mais plutôt à une immunoglobuline anti-antigène. (Audigié, Claude et al., 1992 P. 119) La cytofluorométrie permet

des lames l’ensemble étant appelé micro Array ou puce d’ADN. La couleur verte ou rouge indique respectivement une perte ou un gain du matériel génétique. Diagnostic direct surtout aujourd’hui. On analyse directement la mutation elle même. Macro-délétion : grande portion d’ADN sont impliquées. On peut avoir des inversions, translocation : double cassure de deux gènes différents et intégration de l’une dans l’autre : protéine chimérique dangereuse délétère. Duplication (répétition d’un fragment atrophie

phase G1 est très longue tandis que dans les cellules a gros potentiel prolifératif elle est très courte. Dans les cellules cancéreuses on a les phases G1 et G2 très diminuées. Les mécanismes d’oncogenèse sont généralement dus à des altérations des protéines qui interviennent lors des différents points de contrôle cités ci-dessus. Les cultures primaires sont donc permises durant un certain temps avant de rentrer en apoptose ou en sénescence. Ce programme de mort dépend de la longueur des télomères des

ARN : Acide ribonucléique AMP : ampicilline B-UGT1 : bilirubine glucuronosyltransférase DMEM: Dulbecco modified Eagle medium EDTA : acide éthylène diamine tétra acétique FACS : cymomètre de flux en fluorescence GFP: Green Fluorescent Protein Gag: group specific antigens Pol : polymérase Env. : enveloppe HEPES : acide 4-(2-hydroxyéthyl)-1-pipérazine éthane sulfonique IDLV : vecteur lentiviral déficient de l’intégration LB : Lysogeny broth LV : vecteur lentiviral

graines font désormais parties de la collection permanente du Weisman Art Museum à Minneapolis. S'inscrivant à la suite d'autres créations chimériques d'Eduardo Kac, dont le fameux Alba, lapin génétiquement modifié avec une protéine verte de méduse pour le rendre fluorescent, Edunia peut être vu comme une oeuvre d'art "totale", dans la mesure où elle questionne le champ esthétique, religieux, scientifique, politique et, bien sûr, bio-éthique. Développée entre 2003 et 2008, "Histoire Naturelle de

les capacités souhaitées lors des manipulations scientifiques. En 1997, à Tokyo, des scientifique biologistes on annoncés qu’ils avaient créés une souris qui avait été transformée avec un gène de méduse qui produit une protéine verte fluorescente. La petite souris est donc devenue verte. Cette découverte à donné de l’espoir aux chercheurs car ils ont découverts que peut-être que ce gène pourrait montrer quelle ovules ont étés porteuse d’ADN différent. Les animaux sont généralement transformés pour que