bleu de methylene

443 mots 2 pages

COLORATION AU BLEU DE MÉTHYLÈNE

La coloration au bleu de méthylène est une coloration rapide, économique et d'usage courant

I. Solution simple de bleu de méthylène

A. Préparation
Bleu de méthylène 0.1 g
Sérum physiologique 100 ml
Mélanger les cristaux et le liquide jusqu'à dissolution complète des cristaux.
Filtrer une petite partie du liquide réagité avant chaque utilisation.
L'idéal est de pouvoir laisser le bleu de méthylène s'oxyder pendant quelque semaines avant utilisation pour pouvoir obtenir une espèce de coloration "métachromatique". Pour cela, boucher le flacon avec un morceau de coton cardé et non avec le bouchon standard hermétique.

B. Utilisation :

Selles : recherche de formes végétatives d'amibes
Déposer une goutte de bleu de méthylène sur la lame identifiée ;
Prendre un petit morceau de selle à l'aide de la spatule ;
Mélanger l'échantillon à la goutte de bleu de méthylène ;
Recouvrir d'une lamelle en évitant la formation de bulles d'air ;
Observer rapidement la préparation au microscope, à l'objectif x40

Prélèvement vaginal: recherche de formes végétatives de Trichomonas vaginalis
Même procédure que pour les selles en déchargeant tout d'abord l'écouvillon dans 0.5 - 1 ml de sérum physiologique stérile et en l'essorant contre les parois du tube.
On prélève ensuite une goutte du liquide que l'on mélange au bleu.

Prélèvements divers : coloration des cellules, des bactéries et des éléments mycéliens.
Pour les prélèvements sur écouvillon, même procédure que pour les prélèvements vaginaux.

II. Coloration au bleu de méthylène phéniqué (bleu de Kühne)

La coloration la plus informative est la coloration de Gram. Dans le cas ou les réactifs nécessaires ne seraient pas disponibles, une coloration au bleu de méthylène peut renseignersur la morphologie des germes.

Ce colorant (bleu de Kühne) est le même que celui qui sert pour la coloration de Ziehl.

A. Préparation du bleu

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