TP : Recherche d’allèles mutés pour la mucoviscidose à l’aide d’une électrophorèse d’ADN La mucoviscidose est une pathologie génétique sévère, qui se traduit par une augmentation de la viscosité des sécrétions corporelles, elle atteint particulièrement les voies respiratoires et digestives. En cause, des mutations, plus de 2000 répertoriées qui altèrent le fonctionnement du gène CFTR affectant la synthèse de la protéine transmembranaire CFTR. L’objectif du TP est de réaliser un test de …afficher plus de contenu…

(cette étape a déjà été réalisée en laboratoire)On va donc rechercher à amplifier la version de l’allèle non muté du gène et également la version de l’allèle muté du même gène. On dispose ainsi de 2 tubes PCR par individu et il est possible de déterminer son génotype par la présence ou non d’une ou plusieurs mutations.2ème étape : Electrophorèse sur gel d’agarose pour révéler les allèles que possèdent les 2 parents Le principe de l’électrophorèse d’ADN en gelPlacés dans un gel d’agarose et soumis à un champ électrique, des fragments d’ADN de …afficher plus de contenu…

Exemple de résultat pour un patient ZTube A Tube BPosition 2 : Allèle sain G551DPosition 3 : Allèle sain G542XPosition 4 allèle muté Delta F508Position 1 : Allèle sain 621+1Position 4 : Allèle sain DeltaF508Ce patient Z possède donc une mutation il est hétérozygote et porteur sain. Vous présenterez vos résultats sous la forme de votre choixVous indiquerez si le couple a un risque d’avoir un enfant malade et si un diagnostic pré-implantatoire semble nécessaire ( je vois, je sais , je