Beer-Sheva

radiation est totalement absorbée. L’absorbance d’une solution dépend de la nature de l’espèce chimique dissoute, de la nature du solvant, de la radiation incidente, de l’épaisseur de solution traversée et de la concentration de la solution. Loi de Beer-Lambert : A(lambda) = E(lambda)*l*c pour une solution pas trop concentrée. E(lambda) le coeff d’extinction en cm-1.mol-1.L ; l l’épaisseur de la solution traversée en cm et c la concentration en mol.L-1. Or E*l est une constante donc A(lambda)=kc

d’une longueur d’onde fixe telle qu’il peut être absorbé par la molécule. Dans ces conditions, l’absorption est directement proportionnelle à la concentration de la molécule en solution. Cette relation de proportionnalité est énoncée par ma loi de Beer-Lambert : la transmission du REM à travers une solution est T = I/I0. Cependant c’est la densité (DO) ou absorbance qui est proportionnelle à la concentration de la molécule. DO = log(1/T) = (LC ( est le coefficient d’extinction molaire, caractéristique

la solution à 340nm. En effet la NADH est le seul produit de la réaction à absorber la lumière à cette longueur d’onde (alors qu’à 260nm, le NAD+ et le NADH absorbent la lumière) ce qui permet de déterminer sa concentration en solution par la loi de Beer-Lambert. 3. Résultats Mesure de l'activité spécifique : On obtient une absorbance croissante pour l'extrait initial de tissu et pour la fraction éluée 1.On en déduit que la fraction contient la LDH purifiée. L'extrait contient aussi d'autres

L’intensité : I = No. des photons / sec I ~ énergieM / sec /énergie1-photon I ~ A2 (Les détecteurs sont incohérents!) Absorption RX Absorption de RX (absorption photoélectrique) dz I0 I(z) z  dI  I  dz I ( z)  I0 e z Loi de Beer-Lambert Absorption RX µ fluorescence Réflexion et réfraction n c  , n  1    i   10 5  10 8 ,    c ? Loi de Snellius - Descartes n ~ 1.5 - 2 cos   n cos  '   C ,  '  0  C  2 Réflexion

dans le foie BUT : La manipulation se déroule en deux temps, il faut en premier lieu extraire le glycogène du foie puis dans un deuxième temps réaliser le dosage de l'échantillon obtenu par rapport à une gamme étalon en utilisant la méthode de Beer-Lambert . Principe Il s’agit de comparer l’absorbance de la solution de glycogène obtenue par l’extraction à celle d’autre solution de concentration connue Mode opératoire a. Matériels Balance, Broyeur mortier, Fiole à vide, Bêcher, Éprouvette

Analyse Spectroscopie * Spectroscopie ultraviolette Composés qui ne contiennent que des groupements fonctionnels simples. * Spectroscopie visible Composés qui comprennent plusieurs groupements fonctionnels conjugués. * Loi de Beer-Lambert L’absorbance d’une solution d’un composé est proportionnel à la concentration du composé en solution. * Valable à faible concentration Absorbance étalon = absorbance inconnu Concentration étalon concentration inconnu

1) Principe 2) Réactif et appareille b. Mode opératoire I.2.1 Méthodes d’analyses I.2.1.1 Analyse par spectrophotométrie UV visible 1. Principe de la méthode de l’analyse 2. Validité de la loi de Beer-Lambert 3. Preparations des solutions standards 4. Réglage de l’appareil et les données nécessaires 5. Traçage des courbes d’étalonnages de chaque élément 6. Lecture des absorbances de chaque élément et trouvé les concentrations

du XXIe siècle Synthétiser et contrôler la qualité Chap. 3 Exemple : Calculer la conductivité d’une solution d’hydroxyde de potassium de concentration c = 10-2 mol.L-1. Exercices n°4 et 5 p 454 1.4. Analogie avec la loi de Beer Lambert La loi de Beer Lambert montre la proportionnalité entre une grandeur physique mesurable (l’absorbance) et la concentration d’une solution colorée : A =  x l x c De la même manière, la loi de Kohlrausch montre la relation entre une grandeur physique mesurable

peut facilement faire une mesure en termes de concentration absolue car les proportions de chaque produits ou substrats sont parfaitement stoechiométriques et que le l'absorption molaire du NAD+ ou du NADH sont connus. On applique simplement la loi de Beer-Lambert A = C l E ou DA = DC• l • E où C est la concentration (ou DC est la variation de concentration), A est l'absorption (ou DA est la variation d'absorption), l est la longueur du segment lumineux (dans la plupart des cuvettes de spectrophotmètre

longueur d’onde λ qui traverse la solution est appelé spectre d’absorption. La longueur d’onde λ qui correspond à l’absorbance maximale est la longueur d’onde de la radiation dont la couleur est complémentaire de celle de la solution. I. Loi de Beer-Lambert A: absorbance de la solution (sans unité) l: épaisseur de solution traversée (en cm) c: concentration molaire de la solution (en mol.L-1) ελ:coefficient d'absorption molaire (en L.mol-1.cm-1) ελ dépend de l'espèce chimique