Sérum

BIOCHIMIE EXPERIMENTALE 1 EXTRACTION DE L’ALBUMINE DU SERUM PAR CHROMATOGRAPHIE D’AFFINITE BUT Le but de ce TP sera d’extraire l’albumine d’un sérum en utilisant une chromatographie d’affinité, de déterminer la concentration d’albumine dans le sérum, puis de vérifier, à l’aide d’une électrophorèse, que la chromatographie a correctement fonctionné. PRINCIPE Chromatographie d’affinité sur Bleu Sepharose CL-6B La chromatographie d’affinité se fait avec une résine sur laquelle nous avons

Titrage d’un sérum de lapin par ELISA Le but de ce TP est de mettre en évidence, dans le sérum d’un lapin préalablement immunisé par la BSA, la présence d’anticorps spécifiques anti-BSA et de titrer la réaction par la technique de l’ELISA. Le TEST ELISA : L’ELISA est un test qui permet d’analyser les réactions antigène / anticorps. Pour réaliser ce test on utilise une plaque de microtitrage ELISA composés de 96 puits à fond plat. On va venir fixer sur celle-ci l’antigène. Cette technique

des sérums On dilue les sérums afin de diminuer et de déterminer la concentration en anticorps dans les sérums et afin d'évaluer la date de contamination ou de le stade de la maladie. Il faut deux résultats obtenus sur deux semaines d'intervalle au moins, les dilutions se font en solution tampon. II.B Ajout d'antigènes aux différentes dilutions des sérums après incubation Dans la plupart des protocoles, on ajoute une quantité constante de suspension antigénique à chaque dilution de sérum. II

centrifugation (elle se fait à 4000 tours/minute pendant 5 minutes) suivie de la décantation. Les sérums sont placés sur des portoirs puis mis sur la paillasse. On prend des tubes secs et on y prélève des quantités bien définies selon le type d’analyse demandée. On y ajoute les réactifs en fonction de l’analyse à faire. Pour le dosage du cholestérol HDL on procède comme suit : On pipette 500 µl de sérum dans un tube sec On y ajoute 50 µl de réactif HDL (précipitant) et on homogénéise On laisse

Tableau de migration des marqueurs en condition dénaturante (piste 3) pour le gel à 15% : Marqueurs | Masse Moléculaire (Da) | Log MM | Distance de migration (cm) | Phosphorylase B | 96 000 | 4,98 | 0,45 | Sérum Albumine bovine | 67 000 | 4,83 | 0,85 | Ovalbumine | 43 000 | 4,63 | 1,6 | Anhydrase carbonique | 30 000 | 4,48 | 2,25 | Inhibiteur de la trypsine | 20 100 | 4,30 | 3,35 | α-lactalbumine

intéressant dans la méthode indirecte est le fait d'utiliser un premier anticorps spécifique à l'antigène présent. Ainsi le phénomène de spécificité est présent plus fortement dans la méthode indirecte. Dans un sérum de lapin, nous allons rechercher un anticorps contre la BSA, c'est-à-dire, la sérum albumine bovine. I-Matériels et méthodes 1) Liste du matériel Avant toute manipulation, nous avons besoin sur notre paillasse : de pipettes et multipipettes, des microtubes et des portoirs, Trois

(SHA) * Pas de ciseaux * 3 Boites à objets coupants, tranchants, piquants * (DASRI) * 3 poubelles * Un kit de contrôle ultime pré transfusionnel par étudiant (périmé) Il contient : un pic doigt, un sécuritube, un flacon de Sérum physiologique, 4 spatules, un carton, une feuille de plastique Procédure et chronologie * Contrôle d’identité entre le culot, le malade et la carte de groupe * Remplir la carte : nom prénom de transfuseur signature et code du culot

du corps humain (> 99 %du calcium total de l’organisme). Par ailleurs, la concentration en calcium ionisé (Ca libre) dans les liquides extracellulaires est maintenue dans une fourchette très étroite grâce à une régulation des flux de Ca++ entre le sérum et l’os, le rein et l’intestin. Ce contrôle très fin de l’homéostasie calcique persiste malgré les quantités très importantes de Ca ++ échangées de façon quasi permanente. Le maintien de l’homéostasie du calcium est à ce point vital pour l’homme qu’il

matériel sur un chariot de soin. Je place un set à pansement complet, un coupe fil stérile, des gants non stériles à usage unique, des compresses stériles, un pansement américain non stérile, un pansement sec stérile, bétadine SCRUB, dermique, du serum physiologique, une poche poubelle DASRI, une poche poubelle ordure ménagère. L'infirmière valide ce matériel puis m'explique rapidement ce que je devrais faire. Elle me précise qu'il faudra nettoyer les berges avant l'ablation du redon. Ensuite, elle

scène de crime pour effectuer un test de détermination du groupe sanguin. Le premier prélèvement appartient au groupe sanguin AB puisqu’il y a une agglutination avec le sérum anti A et anti B. Le second prélèvement est du groupe O car il y a aucune agglutination avec le sérum anti A et anti B. D’après les informations connus les seules présumées coupables ayant un groupe sanguin AB ou O sont : Bob Onedeugaz, Sophie Stikai et Yvon Samprendrune.