Etude de la cinétique d'apparition / disparition des gènes au cours de la différenciation des iPs en corps embryoïdes

Phe Amandine, Guyot Alexandre

Abstract:

Une cellule souche ayant besoin d'un milieu bien particulier pour pouvoir se développé, nous avons reconstitué un milieu de culture de cellule souche afin de pouvoir faire vivre ces dernières en dehors de leurs naturel.

L'utilisation de feeders (fibroblastes de souris ) s'est alors révélé nécessaire pour assurer le bon développement des cellules dans le nouveau milieu.

Nous avons ensuite différencié nos iPS en EB et, afin de vérifié que cette étape se soit bien déroulé, nous avons effectué une récupération de l'ADN grâce a un marqueur fluorescent. En effet la récupération des ARN permet de savoir si on est bien passé des ips au IB, car chaque transcriptome est propre à la cellule.

Enfin, nous avons suivi l'évolution des cellules pluripotentes en cellules différencié ( Keratinocyte ) en surveillant l'activité de certains gènes en les amplifiant par une technique de PCR.

Introduction:

Les récents travaux de l'équipe japonaise dirigée par le professeur Shinya Yamanaka de l'université de kyoto sur les cellules reprogrammées génétiquement, de manière à redécouvrir un état de pluripotence, d'ou leur dénomination de cellules souches pluripotentes induites ou ips, ont révolutionné l'approche de la médecine régénérative.

Un des défis de cette nouvelle technologie est en effet le contrôle de la qualité des cellules obtenues. Parce qu'elles ont justement le même potentiel biologique que les cellules souches embryonnaire, les iPS peuvent théoriquement entraîner des proliférations tumorales chez l'organisme receveur.

L'étude de la cinétique d'apparition / disparition des gènes au cours de la différenciation des iPs en corps embryoïdes jouera donc un rôles important dans l'optique d'obtenir une culture cellules humaines différencié comme des cellules de peau par exemple.

Nous avons pour