GÉLOSE C.L.E.D. (CYSTINE LACTOSE ELECTROLYTE DEFICIENT)
1. Contexte d’utilisation La gélose C.L.E.D. est un milieu couramment utilisé au cours de l’étude bactériologique des urines. Ce milieu non sélectif est aussi utilisé pour le dénombrement de l’ensemble des bactéries non exigeantes présentes dans des urines (il constitue une des deux faces du système DGU® : Dénombrement des Germes Urinaires). Elle permet de différencier les espèces fermentant le lactose de celles qui ne le fermentent pas. La faible teneur en électrolytes permet d’éviter partiellement l’envahissement par Proteus. 2. Composition en g/L Source de C et de N Facteurs de croissance Source de S Source de C et d’énergie Indicateur de pH Gélose Peptones Extrait de viande Peptone pepsique de viande L-cystine Lactose Bleu de bromothymol Agar pH 4,0 3,0 4,0 0,128 10,0 0,02 13,0 = 7,3

3. Technique • En boîte de Pétri * Ensemencement par la méthode des cadrans pour un isolement. * Ensemencement avec une anse calibrée de 10 µL pour un dénombrement (strie sur un rayon de la boîte de Pétri et stries perpendiculaires au rayon avec l’anse). Strie verticale de la longueur d’un rayon • Système DGU® Ensemencement par immersion. Incubation de 18 à 24 h à l’étuve à 37°C. 4. Lecture 4.1. Caractère lactose L’absence d’électrolytes inhibe partiellement l’envahissement en nappes des Proteus. La fermentation du lactose se manifeste par une production d’acides qui entraîne le virage de l’indicateur (bleu de bromothymol) au jaune. • Colonies jaunes : bactéries lactose + • Colonies bleu-violet : bactéries lactose – 4.2. Dénombrement Comparer la densité des colonies présentes sur la gélose CLED avec la série de reproductions étalons ci-contre correspondant à : 103, 104, 105, 106 et 107 bactéries/mL d’urine
C. LARCHER

Stries serrées perpendiculaire à la 1ère strie

3-Fiche CLED_Mac Conkey – Page 1 / 2 –

GÉLOSES MAC CONKEY
Il existe deux types de géloses Mac Conkey contenant ou non du cristal violet. 1. Contexte