TP n°2 : La spécificité anticorps antigène Ce que l’on sait : Lors d’une infection par le virus du SIDA, l’organisme réagit et produit des anticorps (AC) protéines présentes dans le sang et la lymphe. Les AC vont participer à la défense de l’organisme. La présence de ces anticorps dans le sang est détectable et conduit au diagnostique séropositif de la personne. Objectif : Mettre en place un Protocole expérimentale utilisant la méthode d’Ouchterlony pour tester la spécificité d’un anticorps pour un antigène.
Principe de la méthode d’Ouchterlony

Protocole choisi : (indiquer la disposition des différents produits dans la boite de pétri)

C’est l’immunodiffusion sur gel : les solutions déposées dans les puits creusés dans le gel diffusent de façon homogène dans toutes les directions autour du puits. Deux auréoles de diffusion peuvent donc entrer en contact lorsqu’elles ont suffisamment progressé. Cette zone de contact reste invisible s’il n’y a pas de réaction entre les deux solutions. Quand il y a réaction entre les solutions, il se forme un arc de précipitation visible à l’œil nu. Celui-ci est dû à l’interaction entre de nombreux anticorps et les antigènes spécifiques, entraînant la formation d’un complexe immun.

Résultat attendu

Interprétation d’un arc de précipitation

Modèle d’un AC pour la schématisation

Pour mettre en place ce protocole vous disposez des éléments suivants :        1 1 1 1 1 1 1 tube tube tube tube tube tube tube bouchon bouchon bouchon bouchon bouchon bouchon bouchon rouge : Sérum de lapin immunisé contre la BSA (albumine bovine) rose (1) : Sérum de chèvre (sérum contient de l’albumine) vert (2): Sérum de porc jaune (3): Sérum de lapin naturel (4): Sérum de bœuf bleu (5) : Sérum de cheval blanc (6) : Bovin sérum albumine (BSA)

Préparation d’un gel d’Agar à couler dans une boite de Pétri pour test d’Ouchterlony (une boite pour s’exercer)

1. Peser dans la coupelle 0,2g d’Agar prélevés à l’aide de la spatule 2. Verser