TP20 bioch controle albumine LDH AB2 2008 2009

703 mots 3 pages
BTS AB2

Techniques de BIOCHIMIE (40 points) : TP20 contrôle

Durée : 3 heures

Tous les renseignements sur l’ordre de passage aux appareils sont donnés aux étudiants au début du TP.

Le non respect des consignes de sécurité sera pénalisé dans la limite de 4 points sur 40

Une patiente souffre d’hépatite C non traitée ainsi que de troubles cardiaques. Le médecin lui prescrit un ensemble d’analyses comprenant entre autre un dosage de l’albumine et une détermination de l’activité de la lactate déshydrogénase.

1. Dosage colorimétrique de la serumalbumine par le vert de bromocresol : 26 points
1.1. Principe :
L'albumine-Kit permet le dosage colorimétrique de la sérumalbumine.
A pH 4.2, l'albumine se combine au vert de bromocrésol pour former un complexe bleu-vert qui absorbe à 628nm.
L'intensité de la coloration du complexe est proportionnelle à la quantité d'albumine présente dans l'échantillon.

Réactifs : réactif 1 : étalon, albumine bovine à 50g/L réactif 2 : réactif de coloration, vert de bromocrésol.

1.2. Protocole :
Introduire dans une macrocuve :
- sérum SA dilué : 10 μL
- réactif de coloration noté RA: 2,5 mL
Homogénéiser.
Attendre 5 minutes à 20-25°C.
Lire l'absorbance à 628 nm contre un blanc réactif contenant 2,5mL de réactif de coloration.
Stabilité de la coloration : 30 minutes.

1.3. Mode opératoire :
Les dilutions seront réalisées en eau physiologique.
Réaliser deux essais sur le sérum de la patiente et un essai pour le contrôle.
Réaliser, à partir d'une solution étalon de sérumalbumine à 50 g.L-1, 5 solutions étalons d'albumine qui seront traitées comme l'essai.

1.4. Dosage :
Diluer le sérum noté SA convenablement sous un volume final de 100 L.

1.5. Contrôle :
Réaliser un contrôle de la méthode à partir de la solution de contrôle notée CA à 20g/L.

1.6. Résultats :
1) Indiquer la préparation des solutions étalons.

2) Expliquer la dilution du sérum.

3) Remplir un le tableau de résultats.

4) Tracer la courbe d'étalonnage (papier millimétré

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