THEME 1A – Expression, stabilité et variation du patrimoine génétique TP5 – La variabilité de l’ADN : les mutations
Certains produits chimiques (molécules cancérigènes …) et rayonnements (UV, rayons gammas, rayons X) sont dangereux pour la santé. Nous savons qu’ils peuvent désorganiser le fonctionnement de la cellule en produisant des mutations. Nous allons voir un exemple concret de mutation chez les levures (Saccharomyces cerevisiae, souche Ade 2) à la suite d’une irradiation par les UltraViolets (UV). Problématique : Pourquoi les UV sont-ils dangereux, quel est leur effet sur l’ADN et plus généralement sur les organismes ? Matériel : - Suspension de levures Ade2, boites de pétri stériles, pipette, étaleur, gants, lunettes, charlotte, masque - Ordinateur muni du logiciel MESURIM, photographies des résultats de l’expérience et du logiciel ANAGENE et du fichier Ade2.edi Activités et déroulement des activités 1- Proposez une hypothèse pour répondre à la problématique et concevoir un protocole expérimental qui permettrait de vérifier votre hypothèse. Vous disposez du matériel suivant : - Souche de levure Ade2, ces levures sont rouges mais deviennent blanches quand lors qu’une séquence (gène Ade2) d’ADN est mutée. - Boites de pétri stériles contenant un milieu de culture pour les levures - Matériel stérile de mise en culture des levures - Lampe UV et matériel de protection (blouse, lunettes, gants, charlotte, masque) 2. Réalisez la manipulation dans les conditions les plus propres possibles. NB : La croissance des levures nécessite 4 à 7 jours. Pour la suite du TP, vous utiliserez donc les résultats proposés par le professeur (photographies des boites de pétri à 7 jours). 3. Dénombrez les colonies rouges et blanches aux différents temps d’exposition. Grâce au logiciel Mesurim (voir fiche « aide technique Mesurim) et aux les photographies fournies. Consignez vos résultats dans un tableau à double entrée. REMARQUE : si les colonies sont trop nombreuses (boites 0 et 30