tp exo de tp de svt

3721 mots 15 pages
Licence SPS-L3S5 TP Exp. En Biologie. Responsable du TP: S. GONZALEZ-RIZZO
Département de Biologie UFR SEN U.A. 1
Licence SPS-L3S5
Fascicule de TP
Expérimentation en Biologie
EC52.3

Année 2023-2024
Responsable : Mme Silvina GONZALEZ-RIZZO
Autre intervenant : M. Manuel Lollia silvina.gonzalez-rizzo@univ-antilles.fr Licence SPS-L3S5 TP Exp. En Biologie. Responsable du TP: S. GONZALEZ-RIZZO
Département de Biologie UFR SEN U.A. 2
Avant toute séance, vous devez lire le fascicule de
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Cette solution sera votre solution de travail pour le témoin négatif.
2) Témoin positif : Préparer 9 dilutions en cascade de « 2 en 2 » dans du tampon carbonate/bicarbonate. La solution mère qui vous est donnée est la dilution No.1 du témoin positif (soit 10 tubes en total).
3) Pour chaque antigène qui vous est donnée, effectuer aussi 9 dilutions en cascade de 2 en 2 dans du tampon carbonate/bicarbonate. La solution mère qui vous est donnée sera la dilution No.1(10 tubes en total par Ag).
4. DEPOT DES SOLUTIONS SUR PLAQUE DE MICROTITRATION DE 96 PUITS.
1) Choisir une rangée de puits sur la plaque de microtitration (ou plaque de
96 puits) par Ag :
• 1er rangée le témoin négatif (A1-A5).,
• 2ème rangée témoin positif
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Un précipité se forme dans la zone où les concentrations de ces deux solutions (Ac-Ag) sont optimales pour que la quantité d’anticorps sature les sites antigéniques. Cette zone, appelée « zone d’équivalence » est visible à l’œil nu sous la forme d’un arc blanchâtre. Si on s’éloigne de la zone d’équivalence, on se trouve soit en excès d’Ag et tous les sites antigéniques ne sont pas saturés, soit un excès d’Ac et tous les sites de l’Ac ne sont pas saturés. Dans ces deux cas, le précipité ne se

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