Absorbance

30 AOÛT 2001 HORS-SÉRIE 105 Réinvestissements Réactions acido-basiques. Réactions d’oxydoréduction. Tableau descriptif de l’évolution d’un système chimique. Équivalence. Domaine de prédominance des espèces chimiques. Grandeurs physiques : absorbance, conductance, pH. D - Élaborer un “produit” de consommation : de la matière première à la formulation (3 séances) TECHNIQUES MISES EN JEU ET ACTIVITÉS COMPÉTENCES EXIGIBLES 1. Séparer (1 séance) Illustrations de quelques procédés utilisés en

mesures et à citer les principales applications au laboratoire de biologie médicale. Spectroréflectométrie (*) Turbidimétrie (*) ; néphélométrie (*) Fluorimétrie (*) ; luminométrie (*) Contrôle de la justesse et de la fidélité en longueur d’onde et en absorbance. Contrôle de la thermostatisation. 4. Méthodes de fractionnement, de purification et d’identification 4.1. Centrifugation 4.2. Méthodes chromatographiques 4.2.1. Chromatographie sur couche mince 4.2.2. Chromatographie sur colonne 4.2.3. Chromatographie

acétate d'éthyle ou décane) sont ajoutés à 2,4 mL d'une culture d'algues. Après mélange au vortex pendant 60 s, la solution est laissée au repos pendant 15 min afin de permettre la séparation des phases aqueuse et organique. La densité optique, ou absorbance, de 1 mL de phase aqueuse est alors déterminée à λ = 750 nm. Le pourcentage d'affinité des algues est calculé selon l'équation : % adhésion = 100 × ( A0 − A) , A0 où A0 représente l'absorbance de la culture d'algues avant mélange avec le

log ( Io / I ) équation 2 εΜ coefficient d’absorption molaire (molaire-1.cm-1). εΜ = 5600 (TRP à 280 nm) ; εΜ = 1400 (TYR à 275 nm) ; εΜ = 200 (PHE à 257 nm) ; εΜ = 4000 à 8000 (liaison peptidique à 190 nm ; εΜ = 300 (pont S-S à 250 nm). absorbance TRP Acides aminés TYR > PHE 200 300 figure 7. Spectres UV des acides aminés Longueur d’onde (nm) Biochimie des protéines – Polytech STIA 1 page 16 5.4.2. Fluorescence. Parmi les acides aminés seul le tryptophane, grâce

comme vu précédemment, il est à noter que dans les cas où la précision expérimentale est excellente, la répartition de la variation résiduelle en erreur et en défaut d’ajustement n’a que peu de signification. 171    Linéarité 5000 Unité Absorbance (mUA*s) 4000 3000 y = 16.702x + 0.0967 R² = 0.9999 y = 16.825x + 1.4817 R² = 0.9999 2000 1000 y = 16.835x - 3.5633 R² = 0.9999 0 0.0 50.0 100.0 150.0 200.0 250.0 300.0 concentration en témozolomide (µg/ml) Figure 51 : Droites

constituants prenant part à la transformation du système. On cite à titre d'exemples les réactions acide-base, d'oxydoréduction, de précipitation, etc. III-1-b Méthodes physiques Certaines grandeurs physiques (volume, masse, pression, conductance, absorbance…) sont reliées souvent, par une loi simple, à la concentration d'une ou plusieurs des entités chimiques prenant part à la transformation (réactif ou produit). Leur mesure permet de déterminer les concentrations et d'en déduire l'avancement x de

cathode creuse émet le spectre spécifique de l'élément à doser, le faisceau lumineux traverse le dispositif de réception dont lequel est aspiré l'élément, l'intensité I0 du faisceau se réduit à I. - I et I0 sont détectés et amplifiées. - Les absorbances sont transformées en concentration. - L'analyse par absorption atomique utilise la loi de Beer-lambert: log I/I0 = K.L.C  I0 et I: Intensité du faisceau incident et transmet;  L: Longueur du chemin optique;  C: Concentration de l'élément

6 9 12 Pour réaliser les solutions de la gamme étalon, il faut utiliser des fioles jaugées de 25,0 mL et une burette graduée pour prélever les volumes de la solution mère. © Éditions Belin, 2012 6. 1,40 1,20 1,00 0,80 0,60 0,40 0,20 0,00 Absorbance Le coefficient de détermination est égal à 0,999. Il est donc tout à fait satisfaisant. 7. a. La concentration peut être déterminée graphiquement ou à partir de l’équation de la droite d’étalonnage. Par calcul : 0,47 31,3 mg · L 1. éch 0,015 La

-16 -14 -20 -26 -13 -7 . pH ajuste avec NaOH 0,1 N (disponibles a pH 2,5) Les valeurs elevees de COT et dfabsorbance UV traduisent la presence en quantite importante de matiere organique ; de plus, le rapport UV/COT (appele SUVA : specific UV absorbance), generalement utilise pour souligner le caractere aromatique dfune eau, presente ici des valeurs particulierement elevees. Colmatage Les essais de filtration sont realises sur le pilote fonctionnant a pression transmembranaire constante et

containing 10 mg of enzyme solution (with densities of 1.118 g⋅ml-1 and 1.17 g⋅ml1 for L “Amano” and L-500 respectively) and 5 mM of p-nitrophenyl α-D-glucoside. Reaction is stopped by addition of 3 ml of a 2% w/v Trizma Base solution (pH 8,5). Absorbance due to yellow nitrophenolate ions released is read at 400 nm with an Ultraspec 4000 (Pharmacia Biotech) UV/visible spectrophotometer. The enzyme activity is expressed in enzymatic unit per mg of enzyme preparation (EU/ mg). An Enzymatic Unit represents