Gramme

Bactériologie Milieux de culture Gélose CLED (Cystine Lactose Electrolyte Déficient) * Usage : Utilisé dans l'étude des bactéries contenues dans l'urine. C’est un milieu non sélectif, de nombreuses bactéries, tant Gram + que Gram -, pourront se développer. L’absence d’électrolytes (pas de NaCl) limite le phénomène d’envahissement par les Proteus. (Surtout utilisé en coproculture) * Composition et préparation : * peptone : 4 g * extrait de viande : 3 g * peptone pepsique

substance soluble qui altère le métabolisme normal des cellules de l’hôte. Il existe deux types des toxines: * Exotoxines. * Endotoxines. EXOTOXINES * Définition Les exotoxines sont des protéines produites par les bactéries, GRAM positif ou négatif, et sécrétées dans le milieu environnant, mais elles sont parfois, liées à la surface bactérienne et libérées lors de la lyse. * La structure d’une exotoxine * Cette toxine est codée par un phage (virus qui parasite une bactérie)

Matrice binaire des caractères biochimiques des isolats 42 Tableau17 Identification présomptive des souches 43 Tableau18 Matrice binaire des souches à Gram positif 45 Tableau 19 Matrice de distance des souches à Gram positif 46 Tableau 20 Matrice binaire des souches à Gram négatif 51 Tableau 21 Matrice de distance des souches à Gram négatif 51 Tableau 15 Page 39 Liste des figures Numéro Intitulé Page Figure 1 Evolution de la taxonomie des Listeria (Bind, 1990). 4 Figure 2

la préparation des milieux de culture pour le contrôle biologique des aliments ; (page 3) 2- recherche et dénombrement de micro-organismes (bactéries et champignons) ; (page 5) 3- isolement et identification des bactéries pathogènes (coloration de gram, tests d oxydase et de catalase, test sur galerie API) ; (page 8) 4- test de toxicité sur souris ; (page 12) 5- dosage des toxines protéiques (méthode de BRADFORD). (page 14) INTRODUCTION ORIGINE DES MICRO-ORGANISMES PRESENTS DANS UN ALIMENT :

grâce aux colorations de Gram et des tests comme l'oxydase, l'ONPG, des milieux en tubes et des milieux gélosés sur boîte de pétri. Ces tests et techniques d'identification sont très présents dans le monde industriel dans de nombreux secteurs tels la pharmacie, la cosmétique, l'agro-alimentaire ou l'environnement. II – Résultats 1) Identification de cocci à Gram (+) Le test de coloration de Gram donne une coloration bleue pour le tube, le germe est donc bien Gram (+). Au microscope, on

verrerie du laboratoire á sec Autoclave : stérilisation á la vapeur Incubateur : pour la culture des bactéries Réfrigérateur : conservation des souches et des réactifs Microscope optique : permet l'observation (état frais, coloration de Gram). Spectrophotomètre : pour les prises du D.O. Verrerie : Tout genre de pipettes (20cc, 10cc, 5cc, 2cc, 1cc) utilisées pour l'inoculation Pipettes Pasteur pour l'inoculation et l'ensemencement Micropipettes pour une prise très précise

pneumoniae Virus Mycoplasma pneumoniae Legionella sp. Haemophilus influenzae Bacilles à Gram négatif (entérobactéries) Chlamydia psittaci Coxiella burnetii Staphylococcus aureus Moraxella catarrhalis Autres 0 5 10 15 20 Pneumologie Micro-organismes Haemophilus influenzae 30,5 (21-47) Streptococcus pneumoniae 21,5 (13-28) Moraxella catarrhalis 6,5 (3-10) Staphylococcus aureus 6 (3-10) Bacilles à Gram négatif 16,5 (0-37) Pseudomonas aeruginosa 11 (8-15) Autres 3,5 (1-8) 1 Prévalence des bactéries

triméthoprime o Les quinolones o La novobiocine o La rifampicine o Les nitro-imidazolés B- Antibiotiques inhibant la synthese de la paroi La paroi bactérienne Pour les Gram Négatif elle est composée de petits peptidoglycanes et d’une membrane externe. Pour les Gram Positif elle est composée de grands peptidoglycanes. Les β-lactamines ➢ Mécanisme d’action • inhibent la transpeptidation par les transpeptidases et les transglycosidases (donc la formation

se basant sur les résultats des différents tests il est évident qu’il y a croissance bactérienne dans le produit. Après plusieurs tests, il a été démontré avec quasi-certitude qu’il s’agit de Buttiauxella agrestis, Citrobacter youngae et d’un coccis Gram+ qui est probablement un staphylocoque. Le degré de pathogénicité varie d’une bactérie à une autre et la présence des liposomes peut faciliter l’entrée de substance dans les cellules, ce qui peut inclure les bactéries. Ceci est d’autant plus alarmant

frottis – Séchage du frottis Réalisation d’un frottis – Fixation à l’alcool Réalisation d’un frottis – Flambage à l’alcool Coloration de GRAM – Coloration au violet de gentiane Coloration de GRAM – Mordançage au lugol Coloration de GRAM – Décoloration à l’alcool Coloration de GRAM – Coloration à fuchsine Coloration de GRAM – Séchage de la coloration V Manipulations : Premier jour 1) Prélèvement de microorganismes dans l’environnement : - Réalisez un prélèvement avec