Luciférase

ou fixés et préparés en coupes histologiques, ce qui permet en général une observation plus précise, mais figée et ponctuelle. Localisation subcellulaire par l'utilisation de gènes rapporteurs tels que la GFP (green fluorescing protein) et la luciférase, par immunocytochimie, ou grâce à des molécules radioactives. Différentes colorations, vitales ou non, permettent l'observation des structures au microscope optique : rouge neutre pour les vacuoles, violet dahlia ou cristal pour le noyau...

des industriels pour réaliser des contrôles de nettoyage et d’hygiène. [pic] Le principe du dosage utilise la propriété de l’ATP d’initier la réaction de production de lumière à partir d’une molécule, la luciférine et d’une enzyme, la luciférase. [pic] Réaction chimique permettant l’émission de lumière La quantité de lumière émise en fonction de temps est proportionnelle à la concentration en ATP, et est capté par un luminomètre. Pour l’analyse bactériologique d’un produit

de l'activité. F. Les enzymes transforment les différentes formes d'énergie. Exemple des réactions bioluminescentes : Par l'intermédiaire d'enzymes, on aboutit à une conversion de l'énergie chimique en lumière. Comme exemple, on a l'action de la luciférase sur la luciférine. Les enzymes n'altèrent pas l'équilibre de la réaction chimique catalysée. Thermodynamiquement, on part d'un point pour aller à un autre. Ces deux états ne changent pas, seul le chemin pour y arriver diffère. A k 1 =10 s → B 

| |1 |Luciférine + ATP + luciférase |Aucune lumière produite | |2 |Luciférine + O2 + luciférase |Aucune lumière produite | |3 |Luciférine + ATP + O2 + luciférase |Emission d'une lumière | Remarque : La luciférine et la luciférase (enzyme) sont présentes dans le cytoplasme des cellules

qu’à partir de 200 mètres, cette adaptation est très répandue. Cette production de lumière peut être accomplie par trois processus : la symbiose avec des bactéries bioluminescentes (Vibrio fisheri), une réaction chimique entre la luciférine et la luciférase dans une glande de la peau ou directement sous la peau, ou bien par des cellules spécialisées (photocytes). Cette lumière peut être amplifiée ou filtrée pour donner des couleurs caractéristiques grâce à des organes spéciaux : les photophores. Les

| |activités cellulaires. | |Dosage de l’ATP par bioluminescence (luciférase) ? | | | |Animations :

linéarité, une dilution de l’échantillon est nécessaire. figure ? 3.1.3. Autres méthodes Le dosage de l’ATP, « marqueur » disparaissant rapidement des cellules après leur mort, peut être réalisé grâce à une réaction de bioluminescence catalysée par la luciférase. Des mesures d’activité enzymatique et des marquages radioactifs sont également effectués. L’étude des variations physico-chimiques du milieu (pH, potentiel d’oxydoréduction, production de chaleur) permet de suivre l’évolution de la croissance d’une

chef des démons. Sa révolte est considérée par les gnostiques comme celle de la recherche de la connaissance que Dieu voulait cacher aux hommes. Porteur de lumière, il serait, pour les sectes lucifériennes, plus puissant que Dieu, simple Démiurge (luciférase). A ne pas confondre avec Lucifer, évêque de Cagliari, vers 370, qui provoqua un schisme (luciférianisme) par son attitude sévère envers les évêques partisans de l'arianisme. Les termes de diable, Satan, Lucifer, démon, Belzébuth, Bélial, Méphisto

élément connu répondant également à Hoxa2 (Remacle et al, 2002) et le second ne comporte qu’un promoteur minimal sans aucun élément de réponse au facteur homéotique. Ces trois vecteurs cibles dirigent l’expression de la luciferase de luciole. Le pCDSRα-Rluc (codant pour la luciferase de Renilla) sert dans cette expérience, de contrôle interne de transfection et permet de comparer entre eux, les divers potentiels transactivateurs observés. Enfin, le pCMVHoxa2 (Matis et al, 2001) encodant un facteur

système photoémetteur utilisant 1'ATP. En présence de Mg2+, d'ATP et d'oxygène, la luciférine est oxydée sous l'action de la luciférase en oxyluciférine avec production de lumière. Le mécanisme de la réaction in vitro peut être décomposé en deux étapes : - activation de la luciférine LH, avec formation de luciféryl-adénylate et libération de pyrophosphate. ATP + LH, luciférase + Mg" i - LH,-AMP + PP - oxydation de ce complexe en présence d'oxygène qui donne l'oxyluciférine dans un état excité