Luciférase

est indispensable, et Spallanzani montre en 1790 que l'eau l'est également. Enfin Dubois en 1887 découvre que la bioluminescence met en jeu trois composés : un composé organique oxydable qu'il nomme luciférine, une enzyme spécifique qu'il nomme luciférase et l'oxygène. Beaucoup d'animaux sont capables d'émettre une telle lumière, particulièrement ceux des fonds marins. 700 espèces ont déjà été découvertes mais la plupart sont inconnues car elles vivent dans les abysses qui sont toujours en exploration

Rapport scientifique: Sous clonage du promoteur de Gabarapl1 dans un vecteur reporter Luciférase pGL3 Résumé Lors de cette expérience, nous avons réalisé un clonage. De nombreuses manipulations ont été effectuées. D'abord nous avons préparé l'insert et le plasmide, que nous avons ligaturé. Les bactéries ont ensuite été rendues compétentes avant qu'elles ne soient transformées par le plasmide recombinant. Enfin ; nous avons procédé à

avec la phosphorescence ou la fluorescence (propriétés qu'ont certains corps, d'absorber un rayonnement et de l'émettre à nouveau). En effet, la luminescence des êtres vivants est due à une réaction chimique enzymatique entre la luciférine et la luciférase. Les animaux et végétaux bioluminescents font différentes utilisations de ce phénomène, mais l'Homme en est-il aussi friand? C'est une des questions auxquelles nous allons répondre au cours de ce dossier. Dans cette optique, nous nous attarderons

enzyme-substrat; P1 et P2 = produits de la réaction. Dans le cas de la bioluminescence, la réaction implique la luciférase comme enzyme et la luciférine comme substrat. A noter que le nom « Luciférine » est un nom général sans signification chimique car il existe une très grande diversité des molécules de substrat qui produisent de la lumière sous l’effet de la luciférine. Les termes de luciférine et luciférase sont dus au chimiste lyonnais Raphaël Dubois (en 1887), qui a pour la première fois provoqué une réaction

la bioluminescence a permis le développement de l’ATPmétrie(L'ATPmétrie est une technique de biologie moléculaire, basée sur le principe de la bioluminescence, qui permet de mesurer la quantité d'ATP présente dans un échantillon). En effet, la luciférase est également capable de réagir avec l’adénosine triphosphate (ou ATP). Elle permet donc de quantifier la biomasse (masse totale de toutes les espèces vivantes présentes en un milieu naturel donné à un moment donné) dans un échantillon grâce à un

Tubes 1 2 3 Contenus des tubes Luciférine + ATP + luciférase Luciférine + O2 + luciférase Luciférine + ATP + O2 + luciférase Résultats Aucune lumière produite Aucune lumière produite Emission d'une lumière Remarque : La luciférine et la luciférase (enzyme) sont présentes dans le cytoplasme des cellules du lampyre. La luciférine est le substrat de la luciférase. L'oxygène intervient dans une réaction d'oxydation du complexe luciférine-luciférase. Document 2 : Consommation de dioxygène par des

luciférine et la luciférase sont les deux molécules à l’origine de la bioluminescence. La luciférine, le substrat, va jouer le rôle de support pour la luciférase, l’enzyme qui lui est associée. Le substrat (c’est une molécule catalysée par une enzyme qui peut déclencher une réaction chimique) va être activé et attaché à son enzyme. Un complexe luciférine/luciférase se forme. Excité par un apport conséquent en oxygène sous l’action de son enzyme, le complexe luciférine/luciférase va devenir instable

retard sur gel (figure 1). B) transfections (Figure 2). Le promoteur du gène PIGR contenant le motif E est inséré dans un plasmide en amont du gène de la luciférase (plasmide WT-PIGR). Le plasmide est co-transfecté dans des cellules intestinales avec un plasmide codant les facteurs USF ou MYC. 24h après transfection, l’activité luciférase est analysée (figure 2). -C) immuno-précipitation de chromatine (figure 3). Des cellules en culture sont traitées par la formaldéhyde (induit un pontage

d’autres applications dans le domaine de l’environnement que nous détaillons maintenant: L’introduction chez Pseudomonas fluorescens, au niveau d’un gène codant un enzyme impliquée dans la dégradation du naphtalène des gènes lux codant pour la luciférase de Vibrio fischeri, a montré que la dégradation du naphtalène coïncidait avec une émission lumineuse. Le facteur limitant étant la quantité d’oxygène disponible pour la réaction de bioluminescence. Cette technique permet également de suivre des

conservés entre espèces animales et des protéines PTB sont des cibles pour ces miARN dans prédit la drosophile , souris et les humains. Il existe deux miR-133-sensibles éventuels éléments (MRE) au sein de la nPTB 3 'non traduite (UTR), et un rapporteur luciférase de transporter la 3' UTR est réprimée par miR-133 d'une manière dépendante du MRE. La transfection d'acide nucléique verrouillé (LNA) des oligonucléotides conçus pour bloquer la fonction de miR-133 et miR-1/206 augmente l'expression de nPTB et diminue