Université Mohammed V–Agdal filière SVI-semestre 4 Faculté des sciences – rabat module de génétique et de biologie moléculaire Element de biologie moléculaire Laboratoire de Microbiologie et Biologie Moléculaire

Extraction et digestion de plasmide d’Escherichia coli

Réaliser par:

Fatima zahra

Généralité
Les études de la biologie moléculaire sont le plus souvent anticipées par des techniques de base.
Les principales techniques utilisée couramment sont :
Les extractions des acides nucléiques
Les digestions enzymatiques par les enzymes de restriction
Les électrophorèses sur gel

Objectifs
Au cours de la première séance de Travaux Pratique, nous avons effectué une mini extraction d’ADN plasmidique à partir d’une culture de bactéries d’Escherichia coli, en utilisant la technique de la lyse alcaline. Cette méthode permet de récupérer facilement et rapidement une grande quantité d’ADN plasmidique plus ou moins pur, c’est-a-dire peu contaminé par de l’ADN génomique des protéines (nucléase et autres…) ou d’autres composants bactériens.
Lorsqu’il est suffisamment pur, l’ADN plasmidique peut être digéré sans problème par une enzyme de restriction, ce que nous avons réalisé dans la deuxième séance du TP. Nous pouvons ainsi confirmer ou infirmer la présence d’inserts dans les plasmides, et évaluer leur