Électrophorèse sur gel de polyacrylamide

1.2.Extraction des ARN 1.3.Extraction des 1.3.1. Rappel sur les plasmides plasmides 1.3.2. Purification par Lyse alcaline 1.3.3. Purification par Gradient de chlorure de césium 2.Séparation des acides nucléiques 2.1.Electrophorèse sur gel d’agarose 2.2.Electrophorèse sur gel de polyarylamide 3.Elaboration de Cartes de restrictions des 1.Purification des acides 1.1.Extraction nucléiques de =technique l’ADN permettant d'isoler l'ADN de cellules ou de tissus. L'ADN extrait  digestion, hybridation

II MOHAMMEDIA-CASABLANCA Faculté des Sciences et Techniques Mohammedia Master Sciences et Techniques Spécialité : Sécurité Alimentaire et Démarche Qualité Rapport sur Estimation des lipoprotéines plasmatiques par électrophorèse sur gel de polyacrylamide Présenté par :  Mahaman M. Bassira Année universitaire 2014-2015 INTRODUCTION Les lipides étant insolubles dans l’eau, leur

α)-BSA β)-échantillon à étudier γ)-réactif de Bradford 7- Électrophorèse a- Définition b- Principe c- Préparation du gel polyacrylamide SDS d- Les % utilisé lors du TP e- Les solutions a préparé α)-tampon d’échantillon β)-tampon d’électrophorèse γ)-gel de séparation λ)-gel de concentration V- traitement et analyse des résultats 1- Détermination des concentrations protéiques 2- Calcul du

Compte rendu TP électrophorèse de protéines électrotransfert et immunorévélation I) But du TP Lors du premier TP, nous avions essayé de purifier une protéine du blanc d’œuf, le lysozyme, par chromatographie échangeuse d’ions. Dans ce TP, nous allons vérifier cette purification à l’aide d’une électrophorèse sur gel de polyacrylamide. Puis afin d’identifier précisément l’enzyme nous effectuerons un électro-transfert suivi d’une immunorévélation. II) Principe A°) Electrophorèse L’électrophorèse

Marie Compte rendu TP n°3 Séparation des protéines par Electrophorèse en gel de Polyacrylamide M. SAINT PAUL But : L'électrophorèse a pour but de séparer des molécules chargées au travers d'un gel (un polymère) sous l'effet d'un champ électrique. Dans ce cas-ci, il s'agira de séparer les protéines d'échantillons et de déterminer le poids moléculaire de ces différentes protéines. Principe : Le gel Le gel est constitué d'un mélange d'acrylamide et de bis-acrylamide (produits

Compte rendu du TP : électrophorèse de protéines, électrotransfert et immunorévélation But : L’objectif principal de ce TP est l’analyse par électrophorèse des protéines récupérées dans différentes fractions lors du TP consistant à extraire une molécule d’intérêt, le lysozyme, du reste des protéines d’un blanc d’œuf. Principes : - Electrophorèse : il s’agit d’une méthode qui permet de séparer et de caractériser des molécules. Elle se base sur le déplacement de molécules chargées sous l’effet d’un

afin de déterminer le rendement de la purification ; et par dosage des protéines à l'aide de la méthode de Bradford, pour calculer le facteur de la purification) et de manière qualitative (grâce a deux tests qualitatifs et une électrophorèse sur gel de polyacrylamide-SDS). Chromatographie sur colonne de DEAE sépharose Afin de purifier partiellement la β-galactosidase de l'extrait bactérien (extrait B), on réalise une chromatographie sur résine échangeuse d'ions. Ce type de chromatographie

Électrophorèse de protéines et immuno-révélation But Le but du TP est de vérifier la pureté du lysozyme purifié à partir de blanc d’œuf par chromatographie. Pour cela, deux techniques d’électrophorèse ont été utilisées : SDS-PAGE et Western Blot Principe Au cours de ce TP, nous avons utilisé plusieurs méthodes d’analyse de la pureté d’une fraction. Électrophorèse : Généralités L’électrophorèse est une technique analytique basée sur le déplacement de particules chargées dans

différentes techniques biochimiques couramment employées en laboratoire. A savoir, le fractionnement des molécules au sulfate d’ammonium, suivi d’un dessalage par gel filtration avant de présenter l’étape de chromatographie par échange d’ions. Le projet de ces travaux étant finalement de déterminer les masses moléculaires grâce à une électrophorèse SDS PAGE réalisée en condition dénaturante ou non. II. MATÉRIEL ET MÉTHODES Avant toute description du protocole, il est important de souligner que

organisme donné. Les isoformes présentent habituellement des paramètres cinétiques différents ou des propriétés de régulation différentes. Si on analyse une solution possédant une activité lactate déshydrogénase grâce à une électrophorèse en gel de polyacrylamide dans des conditions non dénaturantes, on peut observer jusqu’à cinq bandes. A gauche, l’extrait enzymatique provient d’un muscle : on obtient une bande qui migre légèrement vers la cathode. A droite, l’extrait provient du