Absorbance
Spectroscopie
* Spectroscopie ultraviolette
Composés qui ne contiennent que des groupements fonctionnels simples. * Spectroscopie visible
Composés qui comprennent plusieurs groupements fonctionnels conjugués. * Loi de Beer-Lambert
L’absorbance d’une solution d’un composé est proportionnel à la concentration du composé en solution. * Valable à faible concentration Absorbance étalon = absorbance inconnu
Concentration étalon concentration inconnu
* Spectre d’absorption * Absorbance en fonction de la longueur d’onde * Utilisé pour confirmer la présence d’un composé soupçonné. * Analyse qualitative * Analyse quantitative * Déterminer la concentration d’un composé dans un aliment.
Dosage direct
Mesurer l’absorbance d’un composé qui absorbe beaucoup la lumière dans la région ultraviolette visible
Dosage indirect
Transformer un composé peu absorbant en un composé qui absorbe beaucoup.
Composé A + Réactif (excès) - > Composé B (coloré) + Réactif (dosage colorimétrique)
Étape de l’analyse quantitative 1. Choisir la longueur d’onde d’absorption maximum du composé pour le dosage 2. Préparer une série de solution étalon pour la courbe d’étalonnage pour trouver la zone de concentration qui sera valable 3. Dilué l’aliment selon la zone de concentration trouvée en 2. 4. Mesurer l’absorbance de la solution et déterminer sa concentration avec l’équation de la droite. (si besoin, une autre dilution pourrait être faite) 5. La concentration de la solution dilué en multiplié par le facteur de dilution * Si avec courbe d’étalonnage, utilise l’équation A=mc * Si un seul étalon, utilise l’équation Cinc = (Ainc*Cétalon) / AÉtalon
Appareil * Colorimètre * Spectrophotomètre * Un blanc est nécessaire pour annuler l’absorbance due à la