Empreinte adn

Pages: 10 (2326 mots) Publié le: 24 février 2011
IDENTIFICATION PAR ADN

Comment identifier une personne grâce à son ADN ?
Dans cette partie, nous analyserons brièvement la structure et la composition de l’ADN, puis cesméthodes d’extraction, ensuite nousétudierons les techniques d’analyse de l’ADN, en enfin les modes d’application pour identifier un individu.

I. Qu’est que l’ADN ?
L’ADN est présent dans toutes les cellules vivantes,il contient l’ensemble des informations nécessaires au développement et au fonctionnement d’un organisme. C’est aussi le support de l’hérédité. L’ADN renferme donc l’information génétique et constitue le génome, c’est-à-dire l’ensemble des gènes.

L’ADN est formé de deux brins. Un brin est composé d'une chaîne de molécules appelées nucléotides.
Un nucléotide est composé de 3 éléments :
* Ungroupement de phosphate (ou acide phosphorique)
* un sucre (désoxyribose)
* une base azotée : l’Adénine (A), la Thymine(T), la Guanine (G) etla Cytosine(C)

Les deux brins d’ADN se faisant face forment une double hélice. Les nucléotides d’un brin sont complémentaires à l’autre et sont reliés par des liaisons d’hydrogène. En face d’une adénine, on trouve toujours une thymine et en faced’une guanine, il y a toujours une cytosine.

Ex : ATGTACCGTAAGTGCCTGTC
TACATGGCATTCACGGACAG

SCHEMA DE LA COMPOSITION CHIMIQUE DES BASES AZOTEES :


ADENINE CYTOSINE GUANINE THYMINE

II. Extraction de l’ADN

L’ADN, étant au plus profond dans la cellule, est impossible d’accès directement. Les techniquesd’extraction consistent à isoler l’ADN des autres composés de la cellule.
Il existe plusieurs protocoles pour extraire l’ADN mais elles suivent à peu près le même schéma :
* Lyses des cellules : c’est-à-dire la destruction par broyage de la membrane plasmique (de lacellule) et de la membrane nucléaire (du noyau) par l’action d’un agent physique, chimique ou biologique et menant la mort de lacellule.
* Elimination des protéines : par solvants organiques tel que du phénol avec plus ou moins de chloroforme
* Concentration de l’ADN par précipitation à l’alcool

Nous allons présenter deux protocoles différents : une extraction d’ADN de la salive et une extraction d’ADN d’un oignon. Bien que similaires,ces deux méthodes présentent quelques étapes différentes.

A. Extractionde l’ADN de la salive
Matériel et ingrédients :
* 1 Éprouvette graduée
* 1 Agitateur (baguette de verre)
* 1 Tube à essais
* Shampooing
* 1 Spatule ou cuillère à café
* 1 Bécher de 250mL
* Éthanol
* Bicarbonate de soude
* Sel (chlorure de sodium)

Protocole Expérimental
* Avant de commencer, plaçons 50mL d’éthanol au réfrigérateur.

*Première étape, nous allons préparer la solution tamponpermettant de libérer l’ADN des cellules. Dans le bécher, nous mélangeons dans 120mL d’eau :
1 cuillère à café de shampooing
1 cuillère à café de bicarbonate de soude
1/4 de cuillère à café de sel
Eviter de faire de la mousse en mélangeant. Placer ensuite la solution au réfrigérateur.
Pourquoi tous ces ingrédients ?
Le shampooing détruit lesgraisses et va donc dissoudre la paroi de cellules buccales qui en est constituées. Le sel et le bicarbonate de soudeservent à augmenter la densité du mélange et vont permettre à la méduse d’ADN de « flotter ».

* La seconde étape consiste masser ses joues contre la paroi des dents pendant 2 minutes pour récupérer les cellules contenant l’ADN à extraire. Cracher la salive dans le tube àessais, jusqu’à atteindre 1mL de salive (environ 1cm).

* Verser dans le tube 2mL dela solution tampon préalablement préparé (c’est-à-dire deux fois le volume de salive), boucher le tube et agiter pendant 2 minutes.

* Ajouter le même volume d’éthanol que le mélange salive et solution tampon en inclinant le tube à essais de façon à ce que les deux phases se mélangent le moins.

*...
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