DIAPO 2

Principe de la polarimétrie

Détecteur
Analyseur
Tube polarimétrique
Polariseur
Lumière naturelle

La polarimétrie est une technique basée sur la mesure de la déviation du plan de polarisation de la lumière.
Dans le polarimètre, la lumière naturelle est d’abord polarisée grâce à un premier prisme avant de traverser l’échantillon contenant des molécules chirales c'est-à-dire optiquement actives. Une molécule chirale ne présente aucun plan de symétrie c'est-à-dire qu’elle n’est pas superposable à son image dans le miroir (énantiomères).
Lors de son passage dans le second prisme, on peut distinguer 2 types de molécules : * Lévogyre si le plan de polarisation de la lumière est dévié vers la gauche * Dextrogyre si le plan de polarisation de la lumière est dévié vers la droite
Le solvant utilisé pour diluer l’échantillon doit être optiquement inactif : molécule symétrique et dépourvue de carbone stéréogénique (chiral).
La rotation produite par la molécule est exprimée grâce à la loi de Biot : αmesuré = [α]D . l . C avec [α]D : pouvoir rotatoire spécifique d’un composé chiral

Réglage de l’équipénombre : alignement de l’analyseur et du polariseur

DIAPO 3

Dans un premier temps nous avons voulu déterminer les constantes cinétiques de la B-D-fructofuranoside hydrolase par polarimétrie.
Nous avons donc utiliser une solution de saccharose à différentes concentrations et nous avons mesuré l’angle de déviation de la lumière pour chacune des dilutions.
A partir de nos résultats au temps t0 et avec la loi de Biot nous avons pu déterminer la concentration initiale en saccharose qui est de 11.785 mg/mL (soit 4.135.10-4 mol).
Ensuite nous avons déterminé la concentration en produit formé c'est-à-dire en glucose et fructose, après hydrolyse à différents temps. Nous avons calculé la concentration en glucose qui est égale à la concentration en fructose puisque la réaction est équimolaire.

A partir des résultats de ces concentrations,