Chromatographie En Phase Liquide à Haute Performance

L’électrophorèse capillaire L’électrophorèse capillaire (EC) est une technique complémentaire des méthodes chromatographiques qui permet la séparation d’un grand nombre de molécules. Tout comme la chromatographie liquide haute performance qui regroupe de nombreux modes de séparation selon la nature des phases stationnaire et mobile utilisées (échange d’ions, partage en phases normale et inverse, adsorption, exclusion...), l’EC regroupe un grand nombre de modes selon la nature de l’électrolyte

CHROMATOGRAPHIE D’EXCLUSION La chromatographie d’exclusion ou de diffusion est une technique qui consiste à séparer les molécules d’une solution en filtrant ces molécules de taille différente dans un gel poreux. Puisque ce type de chromatographie est physique, il n’est pas basé sur l’affinité des molécules avec la phase mobile ou stationnaire. Il est plutôt basé sur la taille des macromolécules en solution. Les grosses molécules dont le diamètre est supérieur à celui des pores sont exclues et

TECHNIQUES DE MOHAMMEDIA COURS CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE A HAUTE PERFORMANCE (CLHP) HPLC Année Universitaire : 2008 - 2009 DEPARTEMENT DE CHIMIE Pr. SAFI Mohamed LST-TACQ/ Dépt CHIMIE/ Pr. M. SAFI/ HPLC-08 2 SOMMAIRE I- INTRODUCTION II- PRINCIPE DE BASE DE LA CHROMATOGRAPHIE III- APPEREILLAGE 1) Réservoir de phase mobile et le traitement du solvant 2) Système de pompage 3) Dispositif d'injection de l'échantillon 4) Colonnes 5) Détecteurs a) Détecteur UV-Visible b) Détecteur

SCIENCES ET TECHNIQUES DE MOHAMMEDIA COURS CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE A HAUTE PERFORMANCE (CLHP) HPLC Année Universitaire : 2008 - 2009 DEPARTEMENT DE CHIMIE Pr. SAFI Mohamed 2 LST-TACQ/ Dépt CHIMIE/ Pr. M. SAFI/ HPLC-08 SOMMAIRE I- INTRODUCTION II- PRINCIPE DE BASE DE LA CHROMATOGRAPHIE III- APPEREILLAGE 1) Réservoir de phase mobile et le traitement du solvant 2) Système de pompage 3) Dispositif d'injection de l'échantillon 4) Colonnes 5) Détecteurs a) Détecteur UV-Visible b) Détecteur spectrofluométrique

méthodes HPLC représentent l’outil de séparation chromatographique le plus courant (à l’échelle analytique ou préparative). La transition entre la chromatographique en colonne et l’HPLC s’est faite grâce à la possibilité de fabriquer des particules de très faible taille (3 - 10 µm) et de granulométrie homogène, qui permettait de réaliser des colonnes très efficaces impliquant la nécessité d'employer des pompes à haute pression pour pousser les solvants (et des tubes résistants pour y mettre les phases

purification incontournable, la chromatographie en phase inversée et vous familiariser avec l’HPLC. Vous devrez comprendre ses caractéristiques (principe), ses intérêts et défauts. La bonne connaissance des propriétés des peptides et de leurs éléments constitutifs, les acides aminés, est à acquérir avant et au cours de ce TP. Méthodes : Vous allez effectuer la digestion protéolytique d’un peptide grâce à la chymotrypsine, analyser en HPLC par chromatographie en phase inversée avec appariement d’ion

http://www2.univ-reunion.fr/~briere COURS DE CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE Dr Thierry BRIERE - Professeur agrégé – Département de Chimie Université de La Réunion MASTER “VALORISATION DES RESSOURCES NATURELLES” et ESIDAI 3 Ce document est mis à disposition sous un contrat CREATIVE COMMONS Vous pouvez l’utiliser à des fins pédagogiques et NON COMMERCIALES sous certaines réserves dont la citation obligatoire du nom de son auteur et l’adresse http://www2.univ-reunion.fr/~briere de son site d’origine

Généralités Classification selon la nature des phases : – Chromatographie en phase gazeuse : φ mobile gazeuse - φ stationnaire liquide : chromato gaz / liquide - φ stationnaire solide : chromato gaz / solide – Chromatographie en phase liquide : φ mobile liquide - φ stationnaire liquide : chromato liquide / liquide – φ stationnaire solide : chromato liquide / solide Temps mort, temps de rétention : T0 : temps mort : temps entre l'injecteur et le détecteur TR : temps de rétention : caractéristique

Chromatographie Page 1 sur 10 1. Définition. C’est une méthode de séparation, non destructrice en son principe, basée sur le fait que le coefficient de partage d’un soluté entre deux phases dépend de la nature du soluté, et donc, si l’une des phases est mobile par rapport à l’autre, les solutés mettront un temps plus où moins long à parcourir le chemin imparti à cette phase mobile. 2. Buts de la chromatographie. On peut distinguer deux objectifs principaux: 2.1. Objectif analytique

Hydrodistillation IV. Extraction 1. Extraction liquide-liquide. Décantation. 2. Extraction solide-liquide : extracteur de soxhlet. V. Centrifugation VI. Filtration VII. Séchage VIII. Point de fusion et indice de réfraction IX. Méthodes chromatographiques 1. Chromatographie sur couches minces (CCM). 2. La chromatographie sur papier. 3. La chromatographie sur colonne 4. La chromatographie liquide à haute pression (HPCL) I. Recristallisation