Dilution

pas de confusion. II. Calcul de la quantité de protéines totales dans la cuve quantité de protéines après dilution au 1/10ème = 0.5925 mg quantité de protéines avant dilution = (0.5925 * 10)* 1 mL = 5.925 mg Pour E1 , quantité de protéines = 0.155 mg III. Activité enzymatique : Concentration d'activité catalytique CAC = Avec Vi=vitesse initiale Fd=facteur de dilution Ve=Volume d'enzyme introduit dans le milieu réactionnel Extrait : CAC = 4.340836 * = 868.1672 µmoles/min/mL

développement des colonies de bactéries sur les boites de gélose. Sur les deux premières boites, où la dilution est de 10-1 et de 10-2, il est difficile de compter les bactéries car elles sont très nombreuses. Dans la boite où la dilution est de 10-3, on compte environ une centaines de bactéries et dans la boite où la dilution est de 10-4, on en compte 11. 0,5x2 = 1ml donc 11x2 = 22 colonies à la dilution 10-4 Soit 2,2.10-5 UFC/ml Sachant que: •la norme est < 105 UFC/ml •la tolérance est jusqu'à

des produits d’entretien (1) Manipuler les produits avec des gants de ménage Ne pas mélanger les produits risque de réactions chimiques dangereuses risque d’inactivation et d’incompatibilité Respecter les indications d’utilisation : les dilutions la température de l’eau les temps de contact préconisés par le fabricant préparer la solution en versant le produit dans le seau ou le bac rempli d’eau et non l’inverse la durée de conservation des solutions diluées 2éme journée régionale :

résultats obtenus pour ces mesures vont permettre de nous renseigner sur la quantité de prothrombine précipitée, le but étant d’en avoir un maximum. Si la manipulation est bien effectuée cette activité enzymatique doit donc être plus importante dans la dilution C2 que dans C1, la seconde précipitation (et centrifugation) ayant pour but de précipiter un maximum de prothrombine. Pendant l’étape de chromatographie échangeuse d’ions les fractions sont également étudiée par spectrophotométrie cette fois à

300 300 d (facteur de dilution de l’extrait) 0,1 0,1 On relève les absorbances suivantes que l’on pose sous forme de graphique : On calculs avec les données précédentes l’activité peroxydasique selon la formule littérales suivantes : POX= (4*ΔA)/(Δt*ε*l) * VR/PE * VE/MF * d Avec : - ε = 26,6 ml cm-1 μmol-1 (coefficient d’extinction molaire du tétragaïacol) - l = 1cm (épaisseur du tube) - ΔA/Δt = variation d’absorbance en fonction du temps - VR/PE = dilution - VE /MF = nombre de

concentrations molaires différentes en colorant E131 par dilution d’une solution mère S0 de concentration molaire : C0= 10,0 mol.L-12- Retrouver par le calcul la concentration molaire de ces 4 solutions filles décrites dans le tableau ci-dessous.Vous présenterez proprement sur votre copie, le calcul de dilution pour une solution fille seulementSolutionVmère (mL)Vfille (mL)Cfille (mol.L-1)S120,025,08,0S210,025,06,0S35,025,04,0S42,025,02,0On fait une dilution donc Cmère x Vmère = Cfille x VfilleCfille = =

concentration en enzyme. 3- Mode opératoire : Pour cette étude on va travailler avec l’invertase sous forme d’autolysat dilué au 1/25 On prépare une gamme de dilution de la solution d’invertase, de chaque dilution on prend 1 ml qu’on ajoute à 1 ml de tampon acétate 50 mM pH 4,7. 1/10 1/25 1/50 1/75 1/100 1/200 1 ml de chaque dilution+1ml acétate 18 RPPORT DE TP D’ENZYMOLOGIE 14 décembre 2009 1ml dans chaque tube 10ml de saccharose B.M 30ºC 1ml invertase diluée+1ml

Thr | + | + | | + | Trp | + | + | | + | Val | + | + | | + | * Dosage du sucre : 1. on prélève 0.5 ml à l’aide d’une pipette automatique dans un pot non stérile que l’on injecte dans un tube à hémolyse qui contient 4.5mL d’eau donc dilution au 1/10 2. bien homogénéiser le tube et on place sur le carrousel en position 1 et on appuie sur sample 3. appuyer sur cancel avant la fin du dernier tube à analyser pour ne pas tordre l’aiguille 4. prendre le ticket et noter les valeurs

germination. Lecture : Après 24h d’incubation à 37°C. Le test hygicult est interprété grâce à des abaques, le résultat lu est d’environ : 5.104 UFC/mL Le test Pétrifilm est interprété par comptage des UFC, le résultat après avoir ramené à la bonne dilution est de : 9.10 4 UFC/mL Nous pouvons noter un écart considérable entre les deux techniques. Le test Hygicult semble plus approximatif de part sa lecture, ce à quoi l’on pouvait s’attendre du fait qu’il indique l’état microbien général. Nous prenons

attendu 30 minutes de stabilisation. 4) Préparation des gammes de dilution : Pendant le temps d’attente de stabilisation, nous en avons profité pour préparer notre gamme de dilution à partir d’une solution de 160 mUI.mL-1 Nous avons préparé des solutions de 80, 40, 20,10 mUI.mL-1. Comme nous remarquons entre les solutions un rapport de 2, nous avons pu préparer ces solutions grâce à une dilution en cascade. III) Résultats : IV) Discussion : Nous remarquons grâce