Électrophorèse

V- Matériels et Méthodes : 11 1. Culture cellulaire 11 2. Trypsination des cellules: 11 3. Transfection: 11 4. Immunofluorescence 12 5. Techniques de manipulation de protéines 13 a. La lyse cellulaire 13 b. Électrophorèse SDS-PAGE et immunodétection des protéines (western blot) 13 VI- Résultats : 14 1- Co-localisation de la p86-AmotL1 et la myosine : 14 2- Co-localisation de la p86-AmotL-1 et le Actine F : 16 3- Effet la surexpression de la p86-AmotL-1

reconnaissent des séquences spécifiques sur l’ADN de 4 à 8 paires de bases, et qui clivent l’ADN sur les deux brins au niveau de ces sites. Elles coupent l’ADN au niveau des ponts phosphodiesters. Visualisation des fragments de restriction (électrophorèse) OH OH An Introduction to Genetic Analysis Les enzymes de restriction Caractéristiques: • la plupart des sites sont des séquences inversées répétées (palindromes) cas de EcoRI: 5 ’ GAATTC 3 ’ 3 ’ CTTAAG 5 ’ • Coupure avec formation

II : 08 10 LES VECTEURS : PLASMIDES, PHAGES, COSMIDES, YAC, BAC, VIRUS 13 I- Les vecteurs en génie génétique : l'ADN plasmidique II- L'ADN phagique III. Cosmides, YAC et BAC 13 17 20 Chapitre III: ENZYME DE RESTRICTION, ÉLECTROPHORÈSE, CARTE DE RESTRICTION 24 I. Enzymes de restriction II. L’électrophorèse sur gel III. Les enzymes utiles en génie génétique: 24 30 31 CHAPITRE IV: CLONAGE ET ÉTUDE DE L’ADN CLONÉ. I - Le clonage II - Les banques génomiques III

Pression osmotique du milieu plasmatique Anions € équilibre électrique Pouvoir tamponElectrophorèse des protéinesAlbumines 60 % PM faible 70 000 Pression osmotique ++ Transporteurs Maladie hépatique (diminution) Maladie rénale ( protéinurie) 35 % Electrophorèse des protéines Globulines PM 200 000 - 400 000 Trois groupes :       enzymes transporteurs  globulines immunoglobulines  A, D, E, M, G Facteurs de coagulation et fibrinolyse 5% Fibrinogène ++Modification de concentration ( anomalie

qu'au positif, l'agglutination ne se fera pas. 4)Analyse de l'ADN (séance 4) Lors de la quatrième séance nous avons analyser l'ADN identifié par la police. Séquence d'ADN:Détermination de la succession des nucléotides le composant. Électrophorèse sur gel:Permet de séparer des molécules en fonction de leur taille en les faisant migrer à travers un gel par application d'un champ électrique. Marqueurs génétiques:Le marqueur génétique est une séquence polymorphe d'ADN aisément détectable

artérielle : 13/8 mmHg ▪ Température : 36 ºc des examens diagnostiques TCA NFS VS PLAQUETTE TP IONOGRAMME BILAN CARDIAQUE BILAN HéPATIQUE BILAN PHOSPHOCALCIQUE BIALN IONIQUE FOLATE,FER ,FERITUNE ELECTROPHORESE DES PROTEINES RESULTAT: tout est normal • • • • • • • Traitements prescrits (B26 21/24h) +oligo élément +poli vitamine +vitamine B1)+1 amp Vitamine

dans le gel à partir d’un gabarit lors du coulage. Grâce à leur densité, les échantillons sont submergés dans la solution tampon et demeurent dans les puits. III-Résultats Séance 1 : les boîtes de la transformation bactérienne Séance 2 : Électrophorèse sur le gel d’agarose. Amorces ou débris d’ARN Plasmides extrait ESR1 Fragment ESR1 Plasmide digéré (Linéaire) Contrôle 3 Contrôle 1 Contrôle 2 Boite 2 (2 semaines après) Boite 1 Puits 1 : ADN marqueur de taille Puits 2 : plasmide

corticaux de rats grâce à son activation par CREB (Yang et al, 2010). Test des comètes : Ce test consiste, après avoir lysé les cellules et soumis l’ADN marqué à un traitement dénaturant à détecter les lésions subies par électrophorèse sur gel d’agarose. En effet après cette électrophorèse, lorsque l’ADN est intact on observe une sphère (noyau) bien délimitée tandis que des lésions seront caractérisées par une trainée partant de la sphère rappelant la forme d’une comète. Dans un premier temps, les auteurs

spécifiques. Pour y parvenir, le biologiste découpe l'ADN en des zones très précises et toujours identiques au moyen d'enzymes de restriction. Il obtient alors une grande quantité de fragments de taille très variable qui sont ensuite séparés par électrophorèse  (= déplacement de particules sous l'effet d'un champ électrique) en fonction de leur longueur. L'opération se poursuit ensuite par l'utilisation de sondes (une sonde est un brin d'ADN synthétisé artificiellement) qui repèrent les séquences uniques

la formation de cette liaison s'accompagne de la perte du pouvoir réducteur de l'ose et blocage de la configuration du cycle.   B. Propriétés liées aux fonctions alcooliques 1. Les complexes avec le bore Ils permettent d'effectuer des éléctrophorèses des oses, ce qui n'est pas possible sans celà puisque les oses ne sont pas chargés naturellement. De plus ils ont permis de démontrer que dans l'α-D-glucose, l'hydroxyle du carbone anomère est en position cis par rapport à l'hydroxyle porté