Électrophorèse

on a eu un rendement assez faible, cela est peut-être dû à des erreurs de manipulation pendant le TP ou un matériel défectueux (dans notre cas la pipette P1000 ne prélevait pas des volumes précis). Enfin, il serait judicieux de réaliser une électrophorèse SDS-PAGE sur les Fraction F1, F2 et E3 : on pourra ainsi vérifier que les protéines ont bien été éluées dans les fractions F et que le lysozyme bien récupéré seul dans la fraction E3.

et méthode III.3.1 Matériel Toutes les femmes de l’échantillon et leurs nouveau-nés ont bénéficié d’une prise de sang et d’un examen clinique. III.3.2 Méthode 745 femmes et leurs nouveau-nés ont été examinés. Pour chaque mère on a pratiqué une électrophorèse de l’Hb. Un contrôle a été fait pour toutes celles qui en avaient déjà fait. Du même coup on a déterminé le VGM, le taux d’Hb, le nombre des globules rouges, le taux d’hématocrite et on a pratiqué un frottis sanguin. Ces mêmes investigations ont

protéiques • Colorants protéiques • Dosages protéiques • Enzymes et Kits de digestion • Réactifs pour méthode ELISA : Trousse à développement anticorps secondaires • Réactifs et accessoires pour Western Blot • Système de dialyse • Réactifs pour électrophorèse • Coloration des gels d'électrophorèse 1D & 2D ● Biologie moléculaire • Étude de l'ADN : Extraction, Purification, Transformation, Détection, Amplification • Étude de l'ARN : Extraction purification, Détection ➔ Les produits d'origine animale

de sonde à demeure étant donné le contexte). Il n’y a pas de fécalome, le reste de l’examen est superposable à celui de la veille. Le poids est à 49 kg pour une taille approximative à 1m60. La biologie retrouve un bilan phosphocalcique et une électrophorèse des protéines plasmatique normaux, la rhabdomyolyse est en cours de correction. L’ECBU revient positive avec une infection urinaire à E Coli, j’instaure alors un traitement par Noroxine 400 1 matin et soir pendant 7 jours (traitement long car

Cycle : Dénaturation à 95°C, 1 à 2 min Hybridation des amorces à 50-55°C, 1 à 2 min Extension des amorces à 72°C, 2 à 3 min Au bout de 30cycles -> taux d’amplification théorique de 109 Détection du fragment amplifié : visualisation directe après électrophorèse en gel d’agarose et par hybridation avec une sonde d’ acide nucléique Sensibilité : Détection d’un micro-organisme présent dans un échantillon dans un délai de quelques heures Problèmes : Contamination éventuelles en cours de manipulation. Pas

46 : Analyse de la transcription Diapo 47 : Northern-blot : Technique basé sur l’hybridation moléculaire Diapo 48 : Protection à la RNAse RNAse c’est une enzyme qui dégrade des ARN simple brin. Ce qui n’a pas était détruit va être détecté pat électrophorèse. Détermination du +1 de transcription: Cartographie à la nucléase S1 basé sur l'hybridation ADN-ARN. : Extension de l'amorce, but: reconnaise le +1 de la transcription elle se base sur l'utilisatin d'une

sont attachées par des liaisons faibles sur la surface. Elles se fixent grâce à des liaisons ioniques. Pour les extraire, on doit modifier la force ionique ou le pH. (Polarisation) L’analyse des protéines extrinsèques et intrinsèques se fait par électrophorèse. On étudie donc le point moléculaire et le point isométrique. Cela permet d’identifier les actions enzymatiques. On peut purifier grâce à des méthodes de chromatographies. 2) Rôles physiologiques Le rôle premier est la délimitation de la

nucléiques en solution en mesurant la densité optique à 260 nm (maximum d’absorption). 2) En raison des groupes phosphoryls, les acides nucléiques sont chargés négativement, ils se comportent comme des polyanions et migrent vers l’anode lors d’une électrophorèse. L’électrophorèse est actuellement l’outil de base de la génétique moléculaire car elle permet de séparer des fragments d’acides nucléiques en fonction de leur taille. * Remarque importante : les molécules se déplacent dans un champ électrique

communautariste, de généraliser le dépistage à l’ensemble des nouveau-nés sans distinction d’origine. Le dépistage de drépanocytose consiste à l’identification de l’HbS. La première étape s’effectue par focalisation isoélectrique ou encore par électrophorèse bien que cette dernière technique soit moins précise et ne distingue pas l’HbS d’autres maladies présentes dans les mêmes populations. Certains laboratoires préfèrent utiliser tout d’abord une chromatographie liquide haute performance sur colonne

non chez un enfant à naître (enfant 2) dans une famille où les parents ne sont pas atteints de drépanocytose mais l’enfant 1 est atteint. zone de dépôt de l’ADN sens de migration de l’ADN père mère enfant 1 enfant 2 allèle HbA allèle HbS Électrophorèse des allèles du gène codant l’hémoglobine des différents membres de la famille. Rq : L’électrophorèse est une technique de séparation des molécules selon leurs propriétés physico-chimiques en les faisant migrer dans un gel. Les différents allèles