Fluorescéine

colorées Le pourcentage de viabilité est : % viab = 100 x cellules mortes / cellules viables Le pourcentage de viabilité est : % viab = 100 x cellules incolores / cellules totales Les cellules viables sont fluorescentes au test FCR Le diacétate de fluorescéine est fluorescent Des estérases intracellulaires non spécifiques hydrolysent le réactif DAF Page 3 Vrai  Faux  Vrai  Faux  Vrai  Faux  Vrai  Faux  Vrai  Faux  Vrai  Faux  Michel Cavalla, Mélanie Dufenieux, Ludivine Guigues, Gaétan

paramètres physico-chimiques influençant la fluorescence de CF: -> Effet de la concentration de CF: Sur le graphe on observe une droite ce qui signifie qu'on a une proportionnalité entre l'intensité de fluorescence et la concentration en fluoresceine. R^2 est presque égal à 1 ce qui nous confirme que nous obtenons quasiment une droite. La carbocifluoresceine émet des photons puisque c'est un fluorophore et donc plus il y a de CF plus il y a émission de photons (proportionnellement). Par conséquent

oxydatif Viabilité cellulaire Enumaration de bactéries et de virus. Apoptose Marquage de l’ANNEXINE V /PI Fragmentation de l’ADN: méthode du TUNEL Marquage extrémités 3’ des fragments d’ADN par un poly-U marqué à la biotine ou la fluorescéine Marquage de l’ADN fragmenté et non fragmenté par le propidium iodide (PI)  Les cellules à ADN fragmenté seront marquées à la fois au PI et au FITC  Les cellules à ADN non fragmenté seront uniquement marquées au PI PI Evaluation de

anti-immunoglobulines de lapin marqué à l'isothiocyanate de fluorescéine, dilué au 1/100, pendant 30 minutes. - Rinçage au P.B.S. - Action d'une solution de Bleu d'Evans diluée au 1/1000 pendant 30 minutes. - Rinçage rapide au P.B.S. puis séchage et montage de la préparation à l'aide de glycérine tamponnée pH 7,2. Le Bleu d'Evans, colorant qui pénètre dans les cellules, émet une fluorescence rouge. L'isothiocyanate de fluorescéine émet une fluorescence verte. 9 DOCUMENT 7 FLUORESCENCE

expérience est réalisable avec de la poussière de craie. Expérience : L’ enseignant explique que nous allons essayer de voir le faisceau lumineux , pour se faire nous allons utiliser des bacs contenant de l’eau plus quelques gouttes de lait (ou fluorescéine), puis nous allons éclairer le bac avec une source lumineuse. Le faisceau lumineux se voit encore mieux à la verticale au dessus de l’eau. Laisser chaque groupe faire l’expérience et faire les constatations suivantes : Le trajet de la lumière

de chaleur par échange avec le milieu ambiant Retour à l'état fondamental par émission lumineuse ( de plus grande longueur d'onde que l'onde de stimulation) = spectre de fluorescence Colorimétrie Colorants : biotine, digoxygénine, fluorescéine Exemple : l'ADN cible est fixé sur une membrane et les sondes sont biotinylées. La détection est réalisée par ajout d'un complexe streptavidine-HRP (HorseRadish peroxidase ou Péroxydase de Raifort), l'enzyme permettant l'oxydation d'un chromogène

vert d'indocyanine. Ils sont plus fréquents que les néovaisseaux de type visible. Ils peuvent être sus-épithéliaux ou "visibles" concernent 15 % des personnes. Se développant sus l'épithélium pigmentaire, ils sont visibles à l'angiographie à la fluorescéine. Ils ont tendance à se développer plus vite et à provoquer, en l'absence de traitement une baisse importante et rapide de la vision. L'évolution de la DMLA humide peut être rapide, conduisant à une perte de la vision centrale dans un délai qui

Préparation� Solution�D3.1�:�500�mg�de�luminol�est�introduit�dans�1L�de�solution�0.1�M�de�soude�caustique�(4g/L).� Flacon�D3.2�:�Fluorescéine�(jaune�vert),�rhodamine�B�(rouge�violacé),�éosine�Y�(jaune).� Solution�D3.3�:�Eau�de�javel.� Expérience� Dans�un�bécher�de�750�mL,�introduire�300�mL�de�solution�de�luminol�D3.1�et�éventuellement�une�spatule�de�fluorescéine�ou� de�rhodamine�B�ou�d’éosine�Y�(flacon�D3.2).�Dans�un�autre�bécher�de�500�mL,�introduire�300�mL�de�lasolution�D3.3.�Placer�le� b

«vision tunnel» Perte de la vision centrale (dans les cas avancés) Examens et tests Les tests pour évaluer la rétine: La vision des couleurs L'examen de la rétine par ophtalmoscopie après les élèves ont été dilatées Angiographie à la fluorescéine La pression intraoculaire Mesure de l'activité électrique de la rétine (électrorétinogramme) Réaction de la pupille réflexes Test de réfraction Photographie de la rétine Test de vision latérale (champ visuel) Examen à la lampe à fente L'acuité

la lampe (temps de rupture du film diminué). L’examen, douloureux, est facilité par l’installation de collyre anesthésique. Le test de Schirmer ne fait que confirmer l’impression clinique ; l’utilisation des colorants est plus intéressante : la fluorescéine et le rose bengale illustrent les altérations de la surface conjonctivale et cornéenne. L’évolution peut être grave, marquée par des épisodes d’ulcération, de néovascularisation avec opacification de la cornée, voire perforation. La recherche