Fragment

de façon spécifique la position de ces sites sur notre fragment en comparant les tailles des différents fragments obtenus après digestion par ces enzymes. 3- Electrophorèse sur gel d’agarose. Quand le plasmide est digéré, on peut alors faire l’électrophorèse pour connaitre les tailles de nos fragments d’ADN plasmidique obtenus. On utilise pour la comparaison un marqueur de taille qui nous permettra de déterminer la taille de nos fragments et de positionner les sites de restriction sur le plasmide

La digestion séparée du plasmide par les enzymes HindIII, EcoRI et PstI achevée, il faut ajouter la solution de charge avec ses 2 indicateurs de migration le bleu de bromophénol qui migre comme un fragment d'ADN de 500 pb et le xylène cyanol qui se déplace comme un fragment de 5000 pb. Un échantillon avec le plasmide non digéré est également préparé ainsi qu'un marqueur de taille (ADN du phage l digéré par HindIII). Cinq dépôts sont effectués, chacun dans un puits du gel d'agarose puis l'électrophorèse

philosophe de renom du XVIIème siècle, entreprit d’écrire en 1658 une apologie de la religion chrétienne, mais sa mort en 1662 laissa l’ouvrage inachevé. Les Messieurs de Port-Royal se lancèrent alors dans la publication posthume des quelques huit cents fragments laissé par l’auteur, et donnèrent à cette œuvre le titre de « Pensées ». Le but principal de cette apologie est, pour Pascal, de convaincre le libertin de la nécessité de la foi en Dieu. Pour mieux convaincre son lecteur de la « misère de l'homme

être introduites dans des levures Saccharomyces cerevisiae, où ces molécules se maintiennent sous la forme de chromosomes artificiels (YAC ou Yeast Artificial Chromosomes). Pratiquement, le système consiste à lier in vitro un plasmide et des fragments d'ADN de mammifère et à transformer ces molécules d'ADN recombinant dans des levures. Le plasmide porte les unités fonctionnelles principales des chromosomes de levure (fig1) : -un centromère (CEN4) qu'on trouve sur chaque chromosome et qui assure

polymères, sous l'effet d'un champ électrique. En milieu basique, les fragments d’ADN sont chargés négativement. Placés dans un champ électrique à courant continu, ils vont donc se déplacer vers l’anode, mais leurs charges respectives étant à peu près équivalentes, c’est leurs masses moléculaires qui vont régler leurs vitesses de déplacement à travers les mailles du gel dans lequel ils ont été placés. Afin de déterminer la taille des fragments obtenus, on dépose un marqueur de taille dans un puits. Le gel

alcaline Chapitre 2 : 2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6 2.7 2.8 2.9 2.10 2.11 2.12 2.13 Les polymérases DNA polymérase (réaction) DNA polymérase (exonucléase 3’→5’) DNA polymérase (fonction d’édition) DNA-polymérases (tableau) DNA pol I (E. Coli) Fragment de Klenow T4 DNA polymérase Sequenase Taq polymérase Reverse transcriptase RNA polymérase II (réaction) RNA polymérases (phages) Poly(A) polymérase Chapitre 3 : 3.1 3.2 3.3 3.4 Les ligases DNA ligase (réaction) DNA ligase (E. Coli) DNA

Activité exonucléase 3' 5' Taux d'erreur X 10-6 Fragment de Klenow (E. coli) ADN polymérase T4 ADN polymérase T7 (sequenase) ADN polymérase Taq (T. aquaticus) + + + + 10 + 285 9 40 5 Les ADN polymérases les plus fréquemment utilisées IGM L'ADN ligase Ligature d'une brêche IGM L'ADN ligase Ligature de deux fragments ayant des extrémités franches IGM L'ADN ligase Ligature de deux fragments ayant des extrémités cohésives IGM La

permet à une culture en présence d'ampicilline de sélectionner toutes les bactéries ayant incorporés BlueScript, que ce BleuScript contienne ou non l'insert ( le fragment d'adn phage lambda). Les enzymes de restrictions sont des endonucléases d'origine bactérienne et de véritables 'outils' utilisés en laboratoire pour pouvoir fragmenter l'adn. La coupure se fait en un site particulier reconnu par l'enzyme de restriction. Les séquences de nucléotides habituellement reconnues par les enzymes sont

repose donc sur l’électrophorèse des fragments de restriction obtenus après digestion de l’ADN des individus étudiés. L’électrophorèse (doc2 c) de l’ADN des enfants de la famille étudiée montre pour chacun d’eux, des bandes correspondant chacune à une population de fragments de restriction de même taille. L’enzyme RsaI a généré dans l’ADN de ces enfants trois ou deux fragments de restriction visibles (car plus longs que 50kpb). Les deux plus petits fragments visibles chez E1 se retrouvent l’un

établir qualitativement un diagramme énergétique d’OM d’une molécule diatomique (Q26) Exos 1, 2, 4 Justifier l’existence d’interactions entre orbitales de fragment en terme de recouvrement ou d’écart d’énergie (Q27) Exos 2, 4 Interpréter un diagramme d’OM obtenu par interaction des orbitales de deux fragments, fournies (Q28) Exos 4 Décrire l’occupation des niveaux d’un diagramme d’OM (Q29) Exos 1, 2, 4 Relier dans une molécule diatomique l’évolution de la longueur