Giemsa

révéler les bandes G utilisent soit l’action d’une enzyme protéolytique soit les conditions douces de dénaturation suivie d’une coloration au giemsa les bands G sombres produisent un marquage permanant. Les bandes R : Les traitements qui induisent un marquage en bandes R implique une dénaturation thermique de l’ADN suivi d’une coloration par le giemsa. Le motif en bande R sombre est l’inverse du motif en bande G sombre d’où le nom de bandes R car Reverse. Propriétés biochimiques et fonctionnelle

5. Faire glisser la lame inclinée à 45° pour étaler uniformément la goutte (figure 4). 6. Sécher le frottis avec le sèche-cheveux. 7. Repérer avec une gommette, la face où se trouve le sang. COLORATION VARIANTE DE LA COLORATION DE MAY- GRÜNWALD - GIEMSA (Porter obligatoirement lunettes et gants et travailler sous la hotte ou dans un local bien aéré) 1. Aligner devant soi, dans l’ordre, les trois flacons : Flacon 1 = fixateur, Flacon 2 = colorant rouge, Flacon 3 = colorant bleu. 2. Placer la lame

appelée coloration V.L.A.F afin de se rappeler les colorants et dans quel ordre ils doivent être utilisés ( Violet, Lugol, Alcool, Fuschine). [pic] 4- La coloration de Giemsa A- Principe La coloration de Giemsa est une coloration polychromatique douce. En effet, le colorant de Giemsa contient 3 colorants (bleu de méthylène, azur de méthylène et éosine, l’élément le plus important étant un composé qui se forme spontanément dans le mélange : l’éosinate d’azur de

: •Cette technique se fait sans traitement préalable . •On utilise une solution de Giemsa •Elle donne une coloration violacée, homogène sur toute la longueur des chromosomes . • On ne peut les distinguer les uns des autres que par leur taille et leur forme. •Ces critères sont insuffisants pour assurer la reconnaissance et l’interprétation correcte des anomalies chromosomiques. Coloration Giemsa standard TECHNIQUES DE MARQUAGE Méthodes classiques du marquage : Objectif : faire

chaque réplication de l'ADN dans ce même milieu les nouveaux brins formés sont ainsi dépourvus de thymine (remplacée par la BrdU). Cette incorporation de BrdU a une conséquence observable si on traite les chromosomes mitotiques par le colorant de Giemsa : les chromatides sont très peu colorées (en blanc sur la schéma) si leur ADN a incorporé la BrdU sur les deux brins ; en revanche elles sont normalement colorées (en noir sur le schéma) si un seul brin de leur ADN a incorporé de la BrdU. Des cellules

lequel cas la réalisation des lames d'examen est secondaire. Le frottis doit être effectué avec soin de manière à ne comporter qu'une couche cellulaire. Les lames subissent alors une coloration au Giemsa. En effet, ces lames sont alors recouvertes d’alcool méthylique pendant 3 minutes, puis de 1mL de Giemsa pendant 15 minutes environ. Rincées avec 10mL d’eau neutre et séchées, les lames sont alors lisibles. L’aspect du parasite varie alors avec l'espèce en cause et avec son stade d'évolution (c'est-à-dire

levant la main -Sécher rapidement à l air Coloration La coloration panoptique de May Grünwald Giemsa (MGG) repose sur l action complémentaire de deux colorants neutres May Grünwald (éosine et bleu de méthylène) et Giemsa (éosine et azurs de méthylène). Le MG fixe le frottis par son méthanol, le MG dilué au 1/2 dans l eau neutre colore les éléments acidophiles et les granulations différenciées. Le Giemsa surcolore les noyaux et colore les granulations azurophiles. *Technique : -Mettre les frottis

Tout les matins un contrôle est effectué pour pouvoir confirmer le bon fonctionnement de la machine. L'analyse consiste a interpréter les résultats bruts et de déterminer si une formule manuelle doit être établie ( cf coloration de May Grunwald Giemsa ). Les résultats moyens sont : NUMERATION GLOBULAIRE ET PARAMETRES ERYTHROCYTAIRES  FORMULE LEUCOCYTAIRE  Intérêt : La numération permet de connaître avec une certaine précision le nombre de cellule dans le sang d’un

long de celle-ci. Il faut par après faire glisser la lamelle d’un mouvement régulier sur toute la surface de la lame inférieure. Après avoir été séchée soigneusement à l’air libre, la lame peut alors être colorée. ( annexe 1: coloration May-Grunwald-Giemsa) Il est important pour qu’un diagnostic cytologique soit valable que le frottis réponde à plusieurs critères de qualité : Le frottis ne doit pas être trop épais au risque de voir les éléments se rétracter et devenir non identifiables ; Le frottis

fournisseur. Tout les matins un contrôle est effectué pour pouvoir confirmer le bon fonctionnement de la machine. L'analyse consiste a interpréter les résultats bruts et de déterminer si une formule manuelle doit être établie ( cf coloration de May Grunwald Giemsa ). Les résultats moyens sont : NUMERATION GLOBULAIRE ET PARAMETRES ERYTHROCYTAIRES  FORMULE LEUCOCYTAIRE  Intérêt : La numération permet de connaître avec une certaine précision le nombre de cellule dans le sang d’un patient. Les résultats