Giemsa

* l’outil d’observation (œil nu, loupe binoculaire LB, microscope optique MO). * le grossissement si nécessaire. Écrire le titre en-dessous du dessin, au crayon à papier, en majuscules et le souligner. Exemple : SANG DE GRENOUILLE, COLORATION GIEMSA, MO X100. Exemple Limbe Nervure principale Nervure secondaire Bourgeon Pétiole FEUILLE DE TILLEUL OBSERVEE A L'ŒIL NU (X1) J’ai réussi si … Dessin Sur une feuille blanche sans carreaux Utilisation uniquement du

cytospray ou laque à cheveux coloration (Harris-Shorr) TECHNIQUES D’ETUDE Ponction organes ponction directe (ganglion, thyroïde, sein…) ou guidée par écho, scanner (poumon, pancréas, rein, médiastin…) étalement séchage à l’air coloration (May-Grünwal-Giemsa MGG) Ponction séreuses : LCR, plèvre, péritoine, liquide articulaire (Tubes à bouchon rouge, flacons type copro ou ECBU) cytocentrifugation dépôts sur lames Coloration (MGG, Papanicolaou…) Technique rapide 1 à 2 heures. TECHNIQUES D’ETUDE 2)

des colorants fluorescents qui se lient sur des séquences spécifiques de l’ADN et donnent ainsi un profil de striation caractéristique de chaque paire. (figure IV29)   Quinacrine ( bandes Q Réactif de Giemsa ( bandes G (reconnaît les liaisons A – T) Solution alcaline chaude + réactif de Giemsa ( bandes R (reconnaît G – C) ( LA MITOSE ET LE CYCLE CELLULAIRE (TP) On peut diviser le cycle cellulaire en deux grandes périodes : L’interphase et la division cellulaire. I) L’Interphase Pendant

différenciation d’éléments figurés non parasitaires. Les techniques spécifiques de certains parasites seront abordées lors de leur étude systématique. Les techniques suivantes seront présentées : état frais, frottis, goutte épaisse, coloration au MayGrünwald Giemsa, leucoconcentration. Elles pourront être pratiquées lors des stages ou éventuellement réalisées sur des sangs non parasités en ce qui concerne la goutte épaisse et la leucoconcentration. Les techniques de recherche de Trichomonas vaginalis et de Schistosoma

Microscopie optique. *bactériologie : - état frais =>observation de la mobilité des bactéries. -coloration de Gram=>observation de la forme et de la couleur des bactéries. *parasitologie :-coloration au May Grünwald-Giemsa : protozoaire/microfilaires. Microscopie électronique. *seule possibilité pour observer les virus (mais coût et complexité +++). La détection directe des antigènes sur les produits pathologiques. * Technique simple et rapide= diagnostic rapide

complémentaires concernant le malade. 1.3.1.1 Cytopathologie Les cellules sont séchées et colorées sur une ou plusieurs lames histologiques, puis examinées au microscope. Les techniques les plus fréquemment utilisées sont celle de May-Grünwald-Giemsa (hématologie) ou la coloration de Papanicolaou (frottis cervico-vaginaux). 1.3.1.2 Biopsie, pièce opératoire et autopsie L’anatomo-pathologiste s’informe des données concernant le spécimen à étudier ou le corps à au- 2002 - 2003 Anatomie

fluorescents : visualiser spécifiquement l'ADN (Moutarde de quinacrine, DAPI = 4',6- diamino-2-phényl- indole ou de l'Iodure de Propidium). - Giemsa : +++, coloration rose violacée de la chromatine. Colorant de base de toutes les techniques de marquage en bandes des chromosomes ; Bandes G : traitement des chromosomes par la trypsine bandes riches en A-T (giemsa). Bandes R : traitement à la chaleur. Bandes riches en G-C (reverse). Bandes C : Sulfate de Baryium met en évidence l’hétérochromatine constitutive

suspectée Immunofluorescence Si pas d’écoulement : C. trachomatis Fond noir Syphilis : Treponema pallidum 2 Ecouvillons alginate 2 à 3cm dans urètre Ulcération génitale Immunofluorescence Ponction ganglion May Grünwald Giemsa Haemophilus ducreyi et Klebsiella granulomatis (agent de la donovanose) CULTURE MICRO-ORGANISMES ISOLES Selon les bactéries recherchées, les milieux de culture sont spécifiques pour N. gonorrhoeae, pour les Mycoplasmes. Pour C. trachomatis

pour une manifestation de carence en fer ou, plus souvent, pour une drépanocytose. On devrait donc ne retenir le paludisme que si l'on a trouvé les parasites dans le sang. 2. Les techniques Elles sont simples : le frottis coloré par le May-Grünwald-Giemsa, ou la goutte épaisse pour examiner un plus grand volume de sang à travers une plus petite surface de lecture. L'interprétation demande un matériel bien entretenu, une coloration bien faite et une certaine habitude pour reconnaître et identifier les

plusieurs chromosomes. Technique permettant de déterminer la position d'un fragment d'ADN dans le génome : le repérage se fait par rapport au bras du chromosome (p:bras court et q:bras long) et par rapport aux bandes (mises en évidence par la coloration Giemsa) du chromosome. I.4. Amplification et sélection d’acides nucléiques particuliers I.4.1. PCR Cette technique décrite en 1985 (K. MULLIS et collaborateurs) permet d’amplifier des séquences d’ADN de manière spécifique et d’augmenter