Hybridation

techniques liées aux acides nucléiques Détection, caractérisation et identification des acides nucléiques Marquage et suivi des acides nucléiques Le marquage est principalement employé dans toutes les techniques qui utilisent une sonde (hybridation, Northern, …..). On distingue le marquage dit 'chaud' utilisant des isotopes radioactifs, et les marquages 'froids' qui utilisent des molécules aux propriétés fluorescentes, luminescentes. Ces dernières sont de plus en plus employées car plus pratiques

polyatomiques : hybridation ›  C’est la recherche d’une combinaison linéaire de deux ou plusieurs OA d’un même atome. ›  On obtient alors de nouvelles orbitales qui répondent à des conditions d’équivalence énergétique et d’orientation spatiale. Combinaison 1 OA s et 1 OA p ›  2 orbitales sp ›  Angle entre les deux axes : 180° ›  Hybridation digonale (molécule linéaire) Combinaison 1 OA s et 2 OA p ›  3 orbitales sp2 ›  Angle entre les deux axes : 120° ›  Hybridation trigonale

certaine régions n’étaient pas conserver sur les ARNmP29 Hybridation : Association entre brin ADN et ARNm correspondant le tout a la globine. Hybride peut être brin d’ADN ou ARN. Renaturation : les deux même brins se réassocient Si on observe une hybridation entre un brin ADN et un ARN on observe des introns Une sonde est utilisé lors d’une hybridation peut avoir différente longueur. C’est une sonde de fonction ( longue , oligont). Les hybridations peuvent se faire sur des fragment d’ADN. Schéma h

repérage d’une séquence d’ADN Digestion par enzyme de restriction ADN génomique extrait Fragments d’ADN Électrophorèse Séparation par taille Hybridation avec sonde sb marquée Choix température * Transfert sur membrane Par capillarité Dénaturation par NaOH Fixation Lavage autoradiographie b-les autres types d’hybridation Hybridation de colonies bactériennes Puces à ADN L’ARN peut aussi être hybridé : northern blot L’hybridation sur puce pour réaliser la carte d’identité d’une

l’environnement ; les mutations sont la source aléatoire de la diversité des allèles, fondement de la biodiversité. Mécanismes ? Génétiques et non génétiques -> arbre du monde vivant I- Diversification par modification du génôme A- Hybridation et polyploïdisation hybridation : fécondation entre 2 individus d'espèces différentes. Hybride souvent stérile (pb d'appariement des Cr en méiose) ; des anomalies en mitose peuvent permettre une fertilité de l'hybride : nouvelle espèce polyploïde -> diversification

Ultracentrifugation Détection, caractérisation et identification des acides nucléique Marquage et suivi des acides nucléiques Marquage radioactif Marquages froids : colorimétrie, fluorescence ; chimioluminescence ; Hybridation moléculaire Southern Blot Northern Blot Dot Blot Hybridation in situ (HIS) Amplification et sélection d’acides nucléiques particuliers PCR RT-PCR Clonage Construction de banques Criblage de banques Utilisation des vecteurs recombinés I.1. Préparation des

ensuite nettoyée par des bains spécifiques pour éliminer les brins d'ADNc ne s'étant pas hybridés car non complémentaires de ceux fixés sur la lame (B). L’ADN est ensuite scannée au laser et une image de la puce est créée : chaque fois qu'il y a eu hybridation, le fluorochrome fixé sur l'ARNm va être excité et va donc émettre une couleur fluorescente et cela est d’ailleurs visible visible par un point de couleur présent sur la puce (rouge pour des fluorochromes émettant dans le rouge...). On compare ensuite

Certains scientifiques considèrent cette éventualité comme un espoir pour cet ours en voie de disparition, dont l’avenir est aujourd’hui très préoccupant, de continuer à se perpétuer à travers le pizzly. Quelles sont les causes de cette hybridation? Hybridation et réchauffement de la planète. Le réchauffement climatique a conduit les ours bruns à remonter vers le Nord. La barrière géographique entre les territoires naturels des ours bruns et des ours polaires est en train de disparaitre, suite à

recherchés. On obtient ainsi une nouvelle variété optimale. Cette technique est basée sur l'exploitation de la variabilité intraspécifique, qui reste souvent assez limitée. D – Les croisements interspécifiques ou hybridations Il est possible de créer de nouvelles espèces de plantes par hybridation. Pour cela, on réalise des croisements dirigés entre deux variétés (ou espèces) différentes connues pour leurs qualités respectives. L'hybridation permet de regrouper ces qualités dans une seule et même plante

Le 18ème siècle et Diderot Diderot pratique une hybridation des genres encore actuelle. On s’accorde de plus en plus à faire de lui le théoricien moderne du théâtre et le premier à avoir écrit à propos d’une esthétique de la scène. On ne joue plus de drames bourgeois, mais c’est à partir d’eux que se développe l’idée du drame moderne. C’est une question de moralisation. Diderot envisage une moralité de l’art et une fonction didactique du théâtre ; ce qui rend ses drames injouables actuellement