Ligase

conduit à une réparation complète. Les mécanismes de réparation de l’ADN ont déjà été détaillés, on ne résume que quelques résultats : - l’excision - resynthèse : les enzymes qui interviennent sont une endonucléase, une ADN - polymérase et une ligase qui synthétisent une nouvelle molécule à partir du deuxième brin. Cette réparation est le mécanisme principal, il s’agit d’une réparation fidèle, aucune erreur n’existe dans la copie. - réparation post-réplicative : ____ Dr S. Coequyt 2005

12-11. On se retrouve avec une amorce d'ARN. Il va falloir l'enlever. Ex de fonctionnement fig 5-51 : fonctionnement du brin retardé. Une fois l'amorce digéré et remplacé on a un 3' de libre et sur l'autre brin un 5' de libre . On a une ADN ligase qui rapproche les deux brins. Chez les eucaryotes, les polymérases sont associées en dimères. La polymérase se trompe. Les protéines rentrent de façon linéiare sinon risque de former des boucles. La fourche de réplication est la structure

de part et d’autre de l'insert IDH, par amplification PCR à l’aide de deux amorces (~ 24 nucléotides) contenant chacune un des deux sites [ Figure 1 ]. La ligation de l’insert IDH dans le vecteur pGEX-2T a été effectuée in vitro en présence de DNA ligase avec traitement préalable du fragment et du plasmide à la phosphatase en alcaline, afin de prévenir toute fermeture du vecteur sans incorporation de l’insert BamHI GGATCC EcoRI GAATTC CCTAGG CTTAAG

|Oxydoréductases | |2 |Transférases | |3 |Hydrolases | |4 |Lyases | |5 |Isomérases | |6 |Ligases | Annexe 6 Inhibition de la 5-alpha-réductase L'inhibition de la 5-α-stéroïde-réductase présente au niveau de certains organes-cibles comme la prostate ou la peau, empêche la transformation de la testostérone

répresseur. La protéine F-Box est le récepteur à l’auxine et se trouve dans le milieu intracellulaire. Lorsque l’auxine s’y fixe, la protéine change de conformation et interagit avec la protéine IAA. On a alors une ubiquitinilation (par une ubiquitine ligase) de la protéine IAA. La protéine est alors reconnue par le protéasome qui va dégrader la protéine IAA. On n’a plus de complexe ARF, on aura alors la transcription du compris. On a donc une activation de la transcription en dégradant le répresseur

part et d’autre de l'insert IDH, par amplification PCR à l’aide de deux amorces (~ 24 nucléotides) contenant chacune un des deux sites ( [ Figure 1 ]). La ligation de l’insert IDH dans le vecteur pGEX-2T a été effectuée in vitro en présence de DNA ligase avec traitement préalable du fragment et du plasmide à la phosphatase BamHI GGATCC CCTAGG EcoRI GAATTC CTTAAG CATGTAA 3’ GTACATT 5’ 5’ ATGGAA 3’ TACCTT ← 3’ TAGTAGCTTTTGTACATT NCTTAAG 5’ 5’ GGA

génétique : L'ADN vecteur (plasmide bactérien ou ADN viral) est coupé par des enzymes de restriction qui vont créer des bouts collants complémentaires de ceux du transgène. L'insertion du transgène dans l'ADN vecteur est réalisée par des enzymes ligases qui lient les bouts collants des 2 fragments d'ADN. (3) La multiplication de la construction génétique : La construction génétique est transférée dans le micro-organisme d'origine (bactérie ou virus) qui est mis en culture et va se multiplier rapidement

la matrice en s’éloignant de la fourche de réplication pour former un brin discontinu. Son élongation ne se réalise pas de manière continue : de courts fragments, appelés fragments d’Okasaki sont synthétisés avant d’être reliés par une enzyme ADN ligase. Amorce de la synthèse d’ADN : assure le début de la synthèse du nouveau brin = court brin d’ADN dont les nucléotides sont assemblés par ADN primase. Brin continu : une seule amorce. Brin discontinu : amorce pour chaque segment d’Okazaki. -

nécessite plusieurs enzymes (E3s pas toujours) * E1 (« ubiquitine activating enzyme ») + ATP active l’ubiquitine * E2s catalysent la liaison avec substrat (« ubiquitine activating enzymes ») * E3s ont des sites pour substrat (« ubiquitine protein ligases ») → Formation de complexes multiubiquitinés 6/ Protéolyse ● Systèmes protéolytiques ➔ Voie ubiquitine-protéasome dépendante (ATP dép) → Protéasome - Intervient dans * Dégradation enzy limitantes et de prot régulatrices * Dégradation prot anormales

En cas de lésion plus importante, le mécanisme d'excision et de resynthèse intervient, faisant appel aux protéines de reconnaissance uvrA, uvrB et uvrC (uvr pour ultraviolet rays), à l'endonucléase, à l'exonucléase, à l'ADN polymérase puis à une ligase. Les mécanismes de réparation 'fautifs' (système SOS) prennent le relais des systèmes de réparation conservatifs. En cas d'une agression massive, les systèmes conservatifs sont saturés, pouvant aboutir à la mort cellulaire. Les systèmes fautifs suppléent