Spectrophotometrie

chromatographie : Conductimètre mesure la conductance de l’électricité (donc la force ionique) : pour savoir si on a bien fait le mélange entre tampon B et tampon A Par méthodes colorimétriques Substance chimique + protéine = modification de couleur Spectrophotométrie Nécessaire d’effectuer une courbe standard (gamme étalon) Méthode du Biuret Réduction du cuivre Cu2+ en Cu+ qui réagit avec W Y et C : couleur bleue Pic d’absorption à 550 nm Test peu sensible Résiste assez bien aux différents composés présents

phosphate (PNPP) par l'enzyme de la phosphatase alcaline, qui transfert ensuite ce phosphate à un accepteur (H2O dans ce cas) par l'intermédiaire d'un complexe enzyme phosphate.1 Pour étudier le taux d’hydrolyse, on s’appuie sur la technique de spectrophotométrie. Pour ce faire, on suit l’augmentation de la concentration du paranitrophénolate dans le temps, qui doit être proportionnelle à l’augmentation de la densité optique à une longueur d’onde de 400 nm. On agit ainsi puisque le substrat paranitrophényl

cellulaire Le développement de µorganismes dans un milieu liquide occasionne un trouble car leur nombre empêche le passage de la lumière au travers de la solution => Ce trouble (turbidité) est proportionnel à la concentration cellulaire => mesure par spectrophotométrie. I0 I DO = Log I0/I = K[cellules] - La DO est proportionnelle à la concentration cellulaire mais dans une certaine gamme (DO < 0,8) -  Méthode rapide, facile et fiable -  Nécessité de faire une courbe étalon -  Comptage morts/vivants II-3-2)

Le dosage par étalonnage consiste à doser une solution par l’intermédiaire de solutions de concentrations connues. 3.  La courbe d’étalonnage se trace en reportant sur un graphique les valeurs d’absorbance de solutions  étalons. 4.  Dans le cas d’un dosage par spectrophotométrie, la courbe d’étalonnage est une droite passant par  l’origine, car l’absorbance est proportionnelle à la concentration. 5.  Avant un dosage par étalonnage, il faut régler le spectrophotomètre à la longueur d’onde lmax de la  solution à étudier

radicaux libres et hydroxy-2,5,7,8-tétraméthylchroman-2-carboxydonc à ralentir ou inhiber, aussi bien les phases d’ini- lique), dont la structure moléculaire cyclique est similaire à celle de la vitamine E. L’obtention du radical cation résulte du Spectrophotométrie directe d’hydroperoxydes insaturés [7, 8] contact de l’ABTS avec une enzyme de Dosage chimique des dérivés oxydés peroxydation (peroxydase metmyoglo• Évaluation des peroxydes [7, 9] bine [23] ou horseradish peroxidase) [24] en pré• Dosage d’hydroperoxydes

dossier est stocké dans le bureau du RAQ W 2. Différents types de contrôles en interne Les contrôles métrologiques au laboratoire concernent: • les balances, DILUMAT et masses ; • les températures ; • les volumes ; • les temps ; • la spectrophotométrie ; Au cours de mon stage, je me suis occupé des vérifications/surveillances des balances, des pipettes, des dispensettes, des doseurs volumétriques, et des étalonnages des sondes de température. Les températures des réfrigérateurs, congélateurs

; • Densité d’un gaz par rapport à l’air : M d= 29 où M est la masse molaire du gaz. • Masses molaires, en g.mol−1 : M(C) = 12 ; M(H) = 1 ; M(O) = 16 ; M(Ca) = 40 ; x (×10−3 mol) 5 4 3 2 1 0 t (×102 s) 0 1 2 3 4 7 Chapitre 3 La spectrophotométrie, pour l’étude d’une réaction lente R´   R´ ´    Couleur d’une solution Une solution est colorée si elle absorbe une partie des radiations de la lumière blanche. La couleur observée est la couleur complémentaire de la couleur

max . Déterminer, graphiquement, ce temps de demi-réaction. ᕥ En réalité les temps du tableau précédent sont obtenus avec une assez grande imprécision. Pourquoi ? Quelle autre méthode plus précise pourrait-on utiliser ? Exercice ᕢ Spectrophotométrie et titrage (5 points) Les ions iodures I–réagissent avec les ions thiosulfate S2O82-. L'équation associée à cette réaction s'écrit : 2I-(aq) + S2O82-(aq) = I2(aq) + 2 SO42-(aq) (1) En présence d'ion iodure, le diiode se transforme en

20C -25 C Dans un tube on met 500ul de réactif +10ul de sérum, Les tubes sont portés au bain marie à 37°C pendant 5 minutes puis on ajoute 500ul de réactif 2 laissé au bain marie pendent 5min et lire la concentration des spécimens à la spectrophotométrie à 250nm Cette méthode est moins spécifique que la technique à l’uréase dont le cout est identique

molécule. Nous verrons également comment procéder à la lecture d’un spectre d’absorption. En annexe, nous donnons un rapide historique de cette branche très riche des sciences, certains rappels d’atomistique et de mécanique, un survol de la spectrophotométrie infrarouge par transformée de fourier, le programme de Terminales S, un tableau des groupes fonctionnels et de leurs vibrations, ainsi qu’une liste d’ouvrages et de sites internet particulièrement intéressants. joel.meillier page 7 / 69 Nouveau