Principe

On utilise les propriétés réductrices du glucose. À chaud et en milieu alcalin, il y a réduction de l'acide 3,5-dinitrosalycilique ou DNS (aussi appelé acide 2-hydroxy-3,5-dinitrobenzoïque) qui joue le rôle d'oxydant, le glucose étant le réducteur.

Réaction de réduction de l'acide 3,5-dinitrosalicylique en acide 3-amino-5-nitrosalicylique (aussi appelé acide 3-amino-2-hydroxy-5-nitrobenzoïque :

Réduction dns.png

Le glucose, quant à lui, est oxydé en divers produits d'oxydation :

Glc \longrightarrow produits \, d'oxydation + ne^{-}.

L'acide 3-amino-5-nitrosalicylique est un composé rouge. Cette réaction n'est pas stœchiométrique : il n'y a pas de bilan d'oxydo-réduction. L'intensité de la coloration rouge est proportionnelle à la concentration de l'ose si l'on opère dans des conditions physico-chimiques constantes. Les droites d'étalonnage ne passent pas toujours par l'origine.

Cette méthode n'est pas applicable au dosage d'un mélange complexe de glucides réducteurs.
Matériel

Spectrophotomètre et ses cuves Tubes à essai lavés et secs Pipette automatique Béchers Fioles jaugées

Solutions

Solution de glucose à 0,005 mol/L DNS Eau distillée Solution à doser
Étapes
Préparation de la gamme d'étalonnage

Dans une série de tubes :

introduire 0 - 0,2 - 0,4 - 0,6 - 0,9 - 1,2 mL de solution de glucose à 0,005 mol/L ; ajuster chaque tube à 1,5 mL avec de l'eau distillée ; ajouter 1 mL de réactif 3-5 DNS ; mélanger et boucher les tubes avec du coton cardé et du papier aluminium ; porter au bain marie à 100 °C pendant 5 min exactement ; refroidir et ajouter 7,5 mL (QSP 10 mL) d'eau distillée dans chaque tube (on suppose que l'évaporation est la même pour chaque tube), homogénéiser et laisser reposer pendant 15 min.

Lire les absorbances à 540 nm contre le blanc (tube no 0).
Essais

Ils sont à traiter dans les mêmes conditions opératoires.
Réaliser