titrage microbiologique

Pages: 9 (2157 mots) Publié le: 2 novembre 2013
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1- CHOIX DE LA METHODE DE DOSAGE
Le principe du dosage microbiologique des antibiotiques est le meme
quelque soit l’antibiotique à doser, mais la méthodologie varie d’un antibiotique
à l’autre. En effet, les conditions optimales de dosage dépendent des
caractéristiques de l’antibiotique et sont influencées par divers facteurs.
Il s’agit ( 2, 5, 7) :
• du milieu gélosé : dont le choixest primordial pour la qualité du dosage.
La composition et surtout le pH du milieu de culture interfèrent avec
l’activité de l’antibiotique, sa diffusion et la croissance de la souche
bactérienne. Il y a aussi l’épaisseur du milieu gélosé (3- 4mm)
• de la souche de bactérie test : qui doit avoir une grande sensibilité vis à
vis de l’antibiotique à doser, une croissance rapide et une bonneconservation dans du sang ou de la glycérine à –80°C.
• Solvant et diluant : il faut un tampon

pH convenable à chaque

antibiotique.
• Les antibiotiques : ils sont caractérisés par leur conservation, leur poids
moléculaire et le pH de la solution mère. En effet si ces conditions ne sont
pas respectées, nous pouvons être confronté à des problèmes de solubilité
de la poudre titrée ainsiqu’à des problèmes de diffusion.

1.1 AVANTAGES (7, 11)
La méthode de dosage microbiologique présente l’avantage de ne
nécessiter qu’un matériel peu couteux, disponible dans tous les laboratoires de
microbiologie. Sa réalisation est simple, peu onéreuse et d’exécution facile par
le personnel technique. Elle s’applique au dosage de tous les antibiotiques et
mesure l’activité antibactérienne del’échantillon en prenant en compte les
éventuels métabolites actifs.

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1.2 LIMITES (5, 7, 11)
Elle constitue souvent une méthode de réalisation longue, avec un délai de
réponse d’environ 24 heures mais qui peut être raccourci à 4 heures dans
certains cas.
Son exactitude est relativement modeste (de l’ordre de 15%) et sa
spécificité est conditionnée par la présence dans l’échantillond’autres
antibiotiques qu’il est important de connaître. La fidélité de la méthode, c’est-àdire la constance de la détermination entre différentes mesures d’un même
échantillon, est limitée par la reproductibilité de l’inoculum employé. Le seuil
de détection varie avec la souche indicatrice, mais des concentrations de 0,03
mg/l sont acceptables avec certaines espéces de bactéries.

2. ANALYSE DESRESULTATS

Il a été difficile de comparer les résultats que nous avons obtenus avec
ceux des autres auteurs, même si les méthodes de dosage microbiologique se
développent, elles répondent souvent à des objectifs variés et il n’est pas
toujours possible de les comparer les unes des autres (11).
En effet notre étude a consisté à faire une validation du dosage
microbiologique des antibiotiquespar diffusion sur gélose, alors que les autres
études étaient basées sur la détermination de l’activité d’un médicament dans les
liquides biologiques (sang, sérum, expectorations etc).
Il est ressorti de notre étude que parmi les antibiotiques utilisés pour le
dosage presque la majorité était active sur les germes testés (Escherichia coli et
Staphylococcus aureus) à des concentrationsdifférentes.
Les antibiotiques que nous avons utilisés pour notre étude appartiennent à
plusieurs familles. Il s’agit des :
- Béta-lactamines (ampicilline, amoxicilline)

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- Cyclines (tétracycline)
- Aminosides (amikacine, gentamicine)
- Macrolides (érythromycine)
- Sulfamide + Triméthoprime (cotrimoxazole).
Mais aussi à diverses formes pharmaceutiques. En effet nous avons travaillé
avec :- Les comprimés (cotrimoxazole, érythromycine)
- Les gélules (tétracycline, amoxicilline)
- Les sirops (amoxicilline, cotrimoxazole)
- Les

formes

ingectables

(ampicilline,

amoxicilline,

gentamicine,

amikacine)
- Les pommades (tétracycline).

A l’issue de nos dosages nous avons eu différents résultats selon la famille
d’antibiotique dosée mais aussi selon la...
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