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1- CHOIX DE LA METHODE DE DOSAGE
Le principe du dosage microbiologique des antibiotiques est le meme quelque soit l’antibiotique à doser, mais la méthodologie varie d’un antibiotique à l’autre. En effet, les conditions optimales de dosage dépendent des caractéristiques de l’antibiotique et sont influencées par divers facteurs.
Il s’agit ( 2, 5, 7) :
• du milieu gélosé : dont le choix est primordial pour la qualité du dosage.
La composition et surtout le pH du milieu de culture interfèrent avec l’activité de l’antibiotique, sa diffusion et la croissance de la souche bactérienne. Il y a aussi l’épaisseur du milieu gélosé (3- 4mm)
• de la souche de bactérie test : qui doit avoir une grande sensibilité vis à vis de l’antibiotique à doser, une croissance rapide et une bonne conservation dans du sang ou de la glycérine à –80°C.
• Solvant et diluant : il faut un tampon

pH convenable à chaque

antibiotique.
• Les antibiotiques : ils sont caractérisés par leur conservation, leur poids moléculaire et le pH de la solution mère. En effet si ces conditions ne sont pas respectées, nous pouvons être confronté à des problèmes de solubilité de la poudre titrée ainsi qu’à des problèmes de diffusion.

1.1 AVANTAGES (7, 11)
La méthode de dosage microbiologique présente l’avantage de ne nécessiter qu’un matériel peu couteux, disponible dans tous les laboratoires de microbiologie. Sa réalisation est simple, peu onéreuse et d’exécution facile par le personnel technique. Elle s’applique au dosage de tous les antibiotiques et mesure l’activité antibactérienne de l’échantillon en prenant en compte les éventuels métabolites actifs.

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1.2 LIMITES (5, 7, 11)
Elle constitue souvent une méthode de réalisation longue, avec un délai de réponse d’environ 24 heures mais qui peut être raccourci à 4 heures dans certains cas.
Son exactitude est relativement modeste (de l’ordre de 15%) et sa spécificité est conditionnée par la présence dans l’échantillon