Électrophorèse

égal au nombre de charges négatives, la protéine possède une charge globale nulle et ne migre pas lorsqu’elle est soumise à un champ électrique, c’est le point isoélectrique (pI). –  Les électrophorèses des protéines sériques de routine sont en général réalisées en milieu alcalin (pH > 8, >9.5 en électrophorèse capillaire), les protéines sont donc chargées négativement. www.admed-ne.ch Electromigration Toute espèce chargée en solution et soumise à un champ électrique E se déplace à une vitesse

PONTILLE Laura VELUD LoicGROUPE : A2 TP BIOLOGIE MOLECULAIRE 1 2014-2015 SEPARATION D’ADN PAR ELECTROPHORESE ANALYTIQUE ET PREPARATIVE OBJECTIF. Le but de ce TP est de purifier l’ADN plasmidique de pUC18-wzc ; d’en établir sa carte de restriction et de calculer le rendement de l’extraction du gène wzc. Pour cela, on fera agir différentes enzymes de restriction sur cet ADN plasmidique puis on réalisera une migration sur gel d’agarose. Pour finir, nous déterminerons la quantité de gène

 INTRODUCTION Les levures sont des organismes eucaryotes et possèdent un noyau avec des chromosomes linéaires. Chez les Saccharomyces, les chromosomes sont au nombre de 16 simples ou 16 paires selon la forme haploïde ou diploïde de la cellule. Les chromosomes de Saccharomyces cerevisiae ont une taille de 200 à 2500kb, et caractérisée par la présence de 3 chromosomes ou plus dont la taille est inférieure à 500kb. On retrouve aussi d’autres genres de Saccharomyces tel

La digestion séparée du plasmide par les enzymes HindIII, EcoRI et PstI achevée, il faut ajouter la solution de charge avec ses 2 indicateurs de migration le bleu de bromophénol qui migre comme un fragment d'ADN de 500 pb et le xylène cyanol qui se déplace comme un fragment de 5000 pb. Un échantillon avec le plasmide non digéré est également préparé ainsi qu'un marqueur de taille (ADN du phage l digéré par HindIII). Cinq dépôts sont effectués, chacun dans un puits du gel d'agarose puis l'électrophorèse

SOMMAIRE Dans cette expérience la technique d’électrophorèse SDS-PAGE a été utilisée pour tracer la droite logarithmique du poids moléculaire en fonction de la distance de migration en utilisant comme référence deux standards qui contiennent des complexes SDS-polypeptide, puis les poids moléculaire d’inconnus ont été déterminés. Il a été trouvé que la protéine phosphorylase B est celle avec la migration la plus précise, puisque en comparant les poids moléculaires (PM) théorique et expérimental

1. Principe général et grandeurs fondamentales La séparation des composés par électrophorèse capillaire résulte de deux mécanismes de transport, l’électromigration et l’électroosmose. 1.1 Électromigration L’électromigration résulte du déplacement d’une espèce chargée lorsqu’elle est soumise à un champ électrique. La vitesse linéaire acquise (ou vitesse électrophorétique) est alors fonction du champ électrique et de la mobilité électrophorétique de l’ion selon la relation suivante : vep

stationnaire et mobile utilisées (échange d’ions, partage en phases normale et inverse, adsorption, exclusion...), l’EC regroupe un grand nombre de modes selon la nature de l’électrolyte de séparation et du capillaire utilisé (électrophorèse de zone, électrophorèse micellaire, électrophorèse sur gel, isoélectrofocalisation, électrochromatographie). L’EC est une méthode d’analyse désormais reconnue en raison de ces qualités intrinsèques : efficacité et résolution élevées, rapidité et automatisation des séparations

Les projections sanguines ou morpho analyse des traces de sang La morpho analyse des traces de sang, est une technique de la médecine légale utilisé par la police scientifique. Les scientifiques utilisent diverses techniques en mathématiques, physique, biologie et chimie pour analyser ces tâches de sang. Dans la morpho analyse les techniques physiques sont plus particulièrement utilisées. En effet la morpho analyse consiste à définir le type de trace, étudier la vitesse d’impact, l’angle d’impact

Compte rendu TP électrophorèse de protéines électrotransfert et immunorévélation I) But du TP Lors du premier TP, nous avions essayé de purifier une protéine du blanc d’œuf, le lysozyme, par chromatographie échangeuse d’ions. Dans ce TP, nous allons vérifier cette purification à l’aide d’une électrophorèse sur gel de polyacrylamide. Puis afin d’identifier précisément l’enzyme nous effectuerons un électro-transfert suivi d’une immunorévélation. II) Principe A°) Electrophorèse L’électrophorèse

d’un échantillon témoin connu. Cela concerne l’analyse de constituants chimiques porteurs de charges électriques. Cette technique peut être utilisée pour « trier » deux types de molécules : des protéines, ou des fragments d'ADN. A) ELECTROPHORESE DES PROTEINES. Les protéines sont des molécules chargées électriquement, les acides aminés constitutifs comprenant des radicaux électronégatifs et électropositifs, leur donnant des propriétés variables selon qu’ils sont placés dans des