Le Tampon

en fonction du temps pour le traitement 1 Légende : le traitement 1 contient 4,0 ml de tampon phosphate saccharose (pH 6,5 à 20°C), 0,5 ml de DCPIP (5,5x10-4M dans 0,01% KCl) et 0,5 ml de la solution mère de chloroplastes à 92,16 µg/ml et est placé à 25 cm de la source lumineuse. Figure [ 2 ] : absorbance à 600 nm en fonction du temps pour le traitement 2 Légende : le traitement 2 contient 4,0 ml de tampon phosphate saccharose (pH 6,5 à 20°C), 0,5 ml de DCPIP (5,5x10-4M dans 0,01% KCl) et 0,5

                        certifie sur l’honneur que les travaux prévus respectent les critères d’éligibilité prévus par l’arrêté n° NOR DEVU0903668A. Nom de l’entreprise : N° RM, RCS ou SIREN : Mention de l’assurance : Fait à le Signature Tampon À remplir par les entreprises réalisant les travaux et le cas échéant par le syndic de copropriété pour le coût revenant au logement. En signant le présent document, l’entreprise certifie sur l’honneur que les équipements,

résultats : Numéro de dépôt | 1Glc | 2Gal | 3Fru | 4Blanc (pas d’enzyme)+tampon+Diholoside | 5βDFru+tampon+Diholoside | 6βDGlu+tampon+Diholoside | 7αDGlu+tampon+Diholoside | 8βDGal+tampon+Diholoside | 9GlcGalFru | Rf | 0.22 | 0.16 | 0.34 | 0.09 | 0.09 | 0.09 | 0.090.22 | 0.09 | 0.160.220.34 | Le dépôt 4 est un essai à blanc il nous permet de savoir quelles enzymes n’ont pas fonctionné. Les dépôts 5,6,7 et 8 contiennent du tampon pour stabiliser le pH pour qu’il reste au pH d’activité optimale des

β)-échantillon à étudier γ)-réactif de Bradford 7- Électrophorèse a- Définition b- Principe c- Préparation du gel polyacrylamide SDS d- Les % utilisé lors du TP e- Les solutions a préparé α)-tampon d’échantillon β)-tampon d’électrophorèse γ)-gel de séparation λ)-gel de concentration V- traitement et analyse des résultats 1- Détermination des concentrations protéiques 2- Calcul du volume a prélevé 3- Dépôt sur puit 4- Analyse

transformation car les membranes en cours d’allongement sont plus fragile. Ensuite, nous avons centrifugé notre culture E.coli pendant 10 minutes à 2500 rpm afin de concentrer les cellules. Après cela, nous avons re-suspendus le culot dans un tampon contenant un tampon Tris HCl et CaCl2 afin de les rendre compétentes pour la transformation. En effet, en présence d’une solution concentré en ions Ca la structure des membranes cellulaire va être altéré et il y aura la création de plusieurs micro perforations

utilisée pour trouver la concentration initiale d’albumine dans le sérum, à partir de son absorbance. Electrophorèse C’est le déplacement de particules chargées sur une bande d’acétate de cellulose sous l’influence d’un champ électrique, dans un tampon véronal de pH=8,8. Toutes les protéines se chargent négativement et migrent vers l’anode à des vitesses différentes. Ce qui permet de les séparer et, après les avoir colorées (rouge ponceau), nous pouvons les caractériser à l’aide de témoins. Nous

photosynthétiques car il y a de l'amidon dans la pomme de terre, ils sont donc négligeables. Ensuite, pour extraire les mitochondries nous avons mixé les pommes de terre avec du tampon de broyage. Le tampon de broyage permet de lyser les cellules. Il contient du TRIS HCl 0.1M à pH=7.5 qui va servir de solution tampon et permettre de maintenir le pH physiologique (environ 7), pH auquel les mitochondries sont fonctionnelles. Il est également constitué de saccharose 0.4M qui va permettre de créer

et le blé. A. Extraction Nous devons récupérer les extraits enzymatiques des feuilles de maïs et de blé, pour cela nous allons récolter 0.500 mg de feuilles des deux plantes. Nous allons ensuite broyer les feuilles (séparément) avec une solution tampon (50 mmol/l et pH 7) qui permet de préserver l’activité enzymatique, le broyat est alors récupéré et centrifugé. Le surnageant étant récupéré et filtré, nous obtenons donc l’extrait enzymatique qui sera conserver dans de la glace durant tout le long

des ions en solution. Le pH du tampon d'équilibration est inférieur au pHi du lysozyme donc les protéines sont chargées positivement, alors que le pHi des autres protéines présentes dans le blanc d'œuf est inférieur au pH de ce même tampon. On utilise alors une résine de carboxylméthyl cellulose chargée négativement qui va alors retenir uniquement le lysozyme. Les autres protéines sont récupérées dans les fractions lors des différents lavages. A l'aide du tampon d'élution, dont le pH est sensiblement

concentration en enzyme. 3- Mode opératoire : Pour cette étude on va travailler avec l’invertase sous forme d’autolysat dilué au 1/25 On prépare une gamme de dilution de la solution d’invertase, de chaque dilution on prend 1 ml qu’on ajoute à 1 ml de tampon acétate 50 mM pH 4,7. 1/10 1/25 1/50 1/75 1/100 1/200 1 ml de chaque dilution+1ml acétate 18 RPPORT DE TP D’ENZYMOLOGIE 14 décembre 2009 1ml dans chaque tube 10ml de saccharose B.M 30ºC 1ml invertase diluée+1ml