Northern blot

les autres sciences biologiques « à l'échelle moléculaire » * 2 Techniques de biologie moléculaire * 2.1 Clonage d'expressions * 2.2 Réaction en chaîne par polymérase * 2.3 Électrophorèse * 2.4 Southern blot * 2.5 Northern blot * 2.6 Western blot * 2.7 Puce à ADN * 2.8 Technologie abandonnée * 2.9 Histoire * 3 Liste de quelques biologistes moléculaires connus * 4 Notes et références * 5 Voir aussi * 5.1 Bibliographie * 5.2 Articles connexes

Criblage d'une banque Criblage avec une sonde qui reconnaît l'ADN IGM Criblage d'une banque Notion de stringence IGM Criblage d'une banque Criblage avec une sonde qui reconnaît une protéine IGM Le Northern blot IGM Le Southern blot 

quantifier l'ADN en biologie moléculaire. On peut utiliser la spectromètrie à 260 nm. Une autre technique fiable permettant la quantification de l'expression d'un gène est le Northern blot. Cette technique a été développée historiquement en utilisant l'hybridation de sondes radioactives ou fluorescente sur l'ADN amplifié. Le Northern blot nécessite des sondes radioactives, ce qui pose problème du point de vue de la sécurité (radioactivité) et du temps d'exposition des films radiographiques (long). La

sur gel de polyarylamide 3.Elaboration de Cartes de restrictions des 1.Purification des acides 1.1.Extraction nucléiques de =technique l’ADN permettant d'isoler l'ADN de cellules ou de tissus. L'ADN extrait  digestion, hybridation (Southern blot), séquençage, PCR, clonage… Différents protocoles pour extraire l'ADN avec même schéma de principe : •Lyse des cellules •Elimination des protéines •Elimination des autres acides nucléiques (ARN...) 4 TD1.TECHNIQUES DE SEPARATION ET D’ANALYSE DES ACIDES

HYBRIDATION MOLÉCULAIRE (SOUTHERN BLOT-NORTHERN BLOT) Plan • Introduction • Hybridation • Les différents types d’hybridation Hybridation en phase liquide Hybridation sur support solide Hybridation in situ (HIS) • Hybridation de type Southern • Hybridation de type Northern • Conclusion introduction Longtemps considérées comme essentiellement intéressantes à titre rétrospectif et épidémiologique, les méthodes de diagnostic virologique se sont considérablement diversifiées et

Détection, caractérisation et identification des acides nucléique Marquage et suivi des acides nucléiques Marquage radioactif Marquages froids : colorimétrie, fluorescence ; chimioluminescence ; Hybridation moléculaire Southern Blot Northern Blot Dot Blot Hybridation in situ (HIS) Amplification et sélection d’acides nucléiques particuliers PCR RT-PCR Clonage Construction de banques Criblage de banques Utilisation des vecteurs recombinés I.1. Préparation des acides nucléiques

de souris adultes et subissent une fusion pour former les myotubes contractiles lorsqu'il est exposé à une densité élevée dans un milieu de différenciation. formation de myotubes et en outre la maturation a été contrôlée visuellement et par Western blot de l'expression de la protéine de chaîne lourde de myosine, un marqueur de différenciation musculaire ( Fig. 1B ).Bien que présente dans la prolifération des myoblastes, des protéines nPTB a été pratiquement éliminée dans les myotubes différenciés

photométrique IV.4.1.6. Titration d’un sérum pour la recherche d’anticorps IV. dIagnostIc VIral 4. techniques diagnostiques 10 IV. Diagnostic viral > 4. techniques diagnostiques Western blot lorsqu’on confirme un résultat obtenu en sérologie de routine, on utilise parfois un test dit Western blot (WB), qui est une modification du principe ElIsa énoncé plus haut. dans le test WB, les protéines d’un lysat viral sont séparées en électrophorèse sur gel de polyacrylamide (PagE), ensuite transférées

la cathode vers l'anode. Les fragments les plus petits sont les plus rapides. 4) L'ADN est transféré sous forme dénaturée sur une membrane de nylon. La position relative des fragments d'ADN est préservée durant le transfert. 5)Méthode du Southern Blot : La membrane est incubée dans une solution contenant une sonde marquée préalablement, soit par la radioactivité, soit chimiquement. La sonde s'hybride alors avec le ou les fragments d'ADN avec lesquels elle présente une homologie. On utilise couramment

sans en avoir manifesté le désir. En cas de méfiance vis-à-vis des banques, les déposants peuvent se ruer sur leurs comptes pour les vider et ainsi créer une crise de liquidité qui peut s'avérer fatale. Le cas s'est produit en 2008 lorsque la banque Northern Rock a du être précipitamment nationalisée par le gouvernement britannique pour éviter une panique plus large.