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BIO 452. Chapitre VI : La traduction des ARNm en protéines Devoir à la maison 5
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A- QCM en ligne
B- CONSTRUCTION D’UN VECTEUR POUR L'EXPRESSION D'UNE PROTÉINE RECOMBINANTE Sur papier libre, vous répondrez aux questions posées ci-dessous (4 pages maximum).
Rappel : toute réponse doit être argumentée.
La Stathmine …afficher plus de contenu…
Si elle est correctement repliée, la protéine de fusion possèdera les propriétés combinées des deux protéines d’origine. Que pourrait-on apprendre de l'observation du signal fluorescent dans des cellules exprimant la protéine de fusion ?
3- Pour produire cette protéine de fusion dans les cellules de souris, il convient d’assembler les séquences codant pour la Stathmine d’une part et la GFP d’autre part afin de réaliser un ADN recombinant codant une protéine de fusion. Il existe deux manières distinctes d’assembler ces séquences. a- Faire un schéma correspondant à ces deux possibilités en indiquant précisément dans chaque …afficher plus de contenu…
b- Quel(s) élément(s) doi(ven)t-être présent(s) pour permettre l’amplification du plasmide dans le colibacille ? c- Faire un schéma légendé du plasmide que l’on souhaite ainsi construire sur lequel figure les différents éléments mentionnés.
5- On introduit le vecteur d’expression ainsi construit dans une cellule de souris (cette opération porte le nom de « transfection » pour une cellule eucaryotes, le terme « transformation » étant généralement réservé aux cellules procaryotes).
Faire un schéma d’une cellule transfectée par ce vecteur et indiquer les différentes étapes (et où elles s’effectuent dans la cellule) menant à l’expression de la protéine de