Examen a l'état de frais
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Etude cytologiqueLa fixation des cellules étalées sur lames est fait :
- par séchage à l'air (comme en technique hématologique),
- par vaporisation d'un spray,
- par immersion dans un fixateur liquide (alcool + éther).
La fixation immédiate, au moment du prélèvement, est indispensable pour préserver les cellules dont seule une bonne conservation permet l'étude cytologique ultérieure.
La coloration des lames se fait :
- par la technique de May-Grunwald-Giemsa (MGG) utilisée en hématologie
- par diverses associations de colorants nucléaires et cytoplasmiques (Papanicolaou, Harris-Shorr)
- éventuellement par des colorations particulières dérivées des techniques histochimiques utilisées en histopathologie, comme par exemple, le PAS, coloration de Gram, de Ziehl, argentation de Grocott,...(à la recherche d'agents pathogènes)ou par des techniques immunohistochimiques utilisant des anticorps marqués.
L’observation microscopique permet de faire une étude morphologique des cellules d’une espèce bactérienne. Elle comprend :
I. Examen à l’état frais
C’est l’examen microscopique de bactéries vivantes, en milieu liquide. Il permet d’apprécier leur mobilité (ou immobilité) et leur morphologie. Préparation :
1. A partir d’une culture en milieu liquide :
Déposer sur une lame propre soit le contenu d’une « anse de platine » soit « une petite goutte » à l’aide d’une pipette Pasteur. Recouvrir la goutte d’une lamelle.
2. A partir d’une culture sur milieu solide :
Déposer une gouttelette de liquide (milieu liquide ou eau) sur la lame. Prélever une trace de culture à l’anse de platine et l’émulsionner dans le liquide.
Recouvrir d’une lamelle.
1. Flamber l’anse de platine 2. Déposer une goutte de la suspension bactérienne
L’examen après coloration permet d’observer des bactéries tuées fixées sur une lame et ayant subi l’action d’un ou plusieurs colorants. Les colorations, réalisées sur des frottis sèches et fixes, sont classées en :
Coloration