Milieux de culture
Intérêt :
Utilisée pour le dénombrement des bactéries aérobies psychrotrophes, mésophiles (flore totale).
Composition:
Tryptone : source de composés azotés organiques
Extrait autolytique de levure : source du complexe vitaminique B
Glucose : source d’énergie et de carbone
Agar-agar : gélifiant.
Principe:
Les substances nutritives apportées par la Tryptone, les facteurs vitaminiques de l’extrait de levure
et le glucose (source énergétique) favorisent la croissance de la plupart des bactéries à dénombrer.
Technique d'ensemencement:
Avec les milieux prêts-à-liquéfier : (ou bien si le milieu est préparé à l’avance à partir du milieu déshydraté), faire fondre la gélose pendant le minimum de temps nécessaire à sa reliquéfaction totale.
- Refroidir et maintenir à 44-47°C.
- Transférer 1 mL du produit à analyser et de ses dilutions décimales
successives dans des boîtes de Petri stériles.
- Couler 10 à 15 mL de milieu.
- Homogénéiser parfaitement.
- Laisser solidifier sur une surface froide.
- Couler éventuellement 4 mL de gélose blanche stérile (Agar bactériologique type A à 15 g/L).
- Laisser solidifier à nouveau.
Incuber :
- à 30°C pendant 72 heures pour la recherche des microorganismes mésophiles.
- à 55°C pour les microorganismes thermophiles.
- à 6,5°C pendant 10 jours pour les microorganismes psychrophiles.
Lecture:
Procéder au comptage des colonies pour chaque boîte contenant entre 10 au minimum et 300
colonies au maximum, suivant les normes appliquées. Lorsqu’elles sont cultivées sur PCA
additionné de lait, les bactéries caséolytiques forment un halo plus clair autour de chaque colonie
(protéolyse de la caséine du lait).
La gélose VRBL
( La gélose lactosée biliée au cristal violet et au rouge neutre )
Intérêt :
La gélose lactosée biliée au cristal violet et au rouge neutre (VRBL)