Technique de l'électrophorèse

Pages: 3 (655 mots) Publié le: 17 novembre 2010
Technique de l’électrophorèse :

Cette méthode permet d’isoler plusieurs constituants d’un mélange, et d’en déterminer la nature par comparaison avec la composition d’un échantillontémoin connu.
Cela concerne l’analyse de constituants chimiques porteurs de charges électriques.
Cette technique peut être utilisée pour « trier » deux types de molécules : des protéines, ou desfragments d'ADN.

A) ELECTROPHORESE DES PROTEINES.
Les protéines sont des molécules chargées électriquement, les acides aminés constitutifs comprenant des
radicaux électronégatifs etélectropositifs, leur donnant des propriétés variables selon qu’ils sont placés dans
des acides ou des bases, avec lesquels ils contractent plus ou moins de liaisons chimiques.
Les protéines peuventdonc se comporter, soit comme des anions, soit comme des cations, suivant les
conditions du milieu, notamment le pH. Par exemple, en milieu basique à pH 8.6 , les protéines sont chargées négativement(et se comportent donc comme des anions).
Placées dans un champ électrique, les molécules de protéines migrent en direction de l'anode ; elles se
déplacent d'autant plus vite au sein d'unesolution spéciale (tampon) à pH 8,6 que leur charge électrique est plus importante, et que leur masse moléculaire est plus faible.
Une solution de protéines à analyser est déposée le long d'une lignetransversale (ligne de départ) sur la bande
de papier imprégnée de la solution.
Le champ électrique est créé par deux électrodes plongeant dans les cuves remplies de solution :
[pic]
Lavitesse de migration d’une protéine sur la bandelette de papier (appelée protéinogramme ; on parle de zymogramme pour des enzymes) est donc finalement fonction de ses acides aminés constitutifs.Lorsque la migration des protéines est suffisante, Ie papier est séché, et les protéines sont colorées.
Par comparaison de l’emplacement des bandes avec celles obtenues pour une substance connue déjà...
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