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TP4 : Analyse des lipides de l’œuf et de l’huile d’olivePonce Fanny1 – Lhomme Chloé1
Résumé
Le but de ce TP est d’étudier deux types de lipides dans des produits d’origine animale (jaune d’œuf de poule) et végétale (huile d’olive). On souhaite tout d’abord isoler les lipides des autres éléments, puis étudier la teneur en lipides dans ces deux produits. La séparation et la révélation s’effectuent grâce à une CCM (chromatographie sur couche mince). Les résultats de cette manipulation sont différents spots observés sur la chromatoplaque. On peut voir différents types de lipides en fonction des spots et de leur migration. (Figure 1, chromatoplaque)
Figure 1 : chromatoplaque « étude des lipides de l’huile d’olive est du jaune d’œuf »
Figure 2 : chromatoplaque « étude des phospholipides de l’huile d’olive »
Mots clefs
Lipides – chromatographie – triglycérols (triglycérides) – chloroforme – rapport frontal – émulsion
Matériel et méthodes
Préparation des extraits lipidiques :
Préparer l'extrait lipidique d'huile d'olive en solubilisant 0,5g d'huile d'olive dans 2mL de chloroforme.
Préparer l'extrait lipidique de jaune d’œuf de poule. Mélanger 2g de jaune d’œuf avec 2mL d'eau distillée ; y ajouter 10mL d'un mélange de 4mL de chloroforme et 8mL de méthanol, mélanger. Et ajouter à ce dernier 3mL de chloroforme ainsi que 3mL d'eau distillée. Passer le mélange à la centrifugeuse (Thermo : jouan BR4i multifonction) à 5000 tr.min-1 pendant 1 min. Placer la phase organique dans un ballon rodé. Évaporer le solvant à l'aide de l'évaporateur rotatif (avec une pression de 500 mbar et une température de 50-55°C de la cuve) pour obtenir un liquide visqueux (pour déterminer la masse de lipides, il faut peser le ballon vide et après l'évaporation des solvants). Et pour finir solubiliser le résidu dans 2mL de chloroforme.
Analyse des lipides par CCM
Afin d’analyser les lipides nous allons faire une CCM, cette technique est basé sur le fait qu'il existe deux