Absorbance Et Concentration

couleur absorbée. 2,0 Absorbance A 1,5 680 nm 58 40 0n m ma ge n ta λmax = 350 nm 1,0 rouge 0n m n jau 0,5 e λ (nm) 0 54 47 u ble m 0n ver t 0n m 300 cyan 500 nm Le spectrophotomètre Il est basé sur l’absorption de la lumière par une solution transparente contenant des espèces colorées (ou tout au moins absorbant dans l’UV ou dans l’IR). Il permet de mesurer une grandeur A appelée absorbance, positive, qui peut être supérieure à un (A = 0 pour une absorbance nulle, A = 1 si 1/10ème

| |Lipolyse  |Dégradation des lipides | |Milieu hypotonique  |Milieu dont la concentration en soluté est faible | |Néoglucogenèse |Ensemble des processus qui conduisent à la fabrication du glucose | |Ovocyte 

d'ébullition car sinon l'analyte sera tout le temps gazeux ( il va donc sortir directement de la colonne ) Détecteurs : Ce que l'on recherche dans un détecteur : stabilité, sensibilité ( dosage de concentration très faible ), reproductibilité, fiabilité, réponse linéaire sur une grande gamme de concentration – Détecteur à ionisation de flamme (FID) : Pour toutes les molécules possédant du carbone, température élevée pour éviter la recondensation, destructif, plus il y a de carbone, plus le signal est

phase aqueuse: 3I- + H2O2 + 2 H+ 2 H2O + I3- L'avancement de la réaction est suivi grâce à la variation de l'absorbance de la solution qui est directement proportionnelle à la concentration de I3- A partir du mécanisme de réaction suivant: H2O2 + I- IOH + OH- (k1) (1) H2O2 + H+ H3O2+

Nous voulons observer ce que devient son activité lorsque l’on fait varier différents facteurs, comme la concentration en substrat initiale dans une première partie, et le pH dans une seconde. Pour s'intéresser à son activité, on se servira du calcul de son activité spécifique dans une situation donnée, et de certaines représentations de la vitesse de réaction en fonction de la concentration en substrat, ou en fonction du pH. Principe La Phosphatase alcaline est une enzyme, c’est donc une molécule

Dosage colorimétrique par étalonnage On se propose de déterminer la concentration en diiode dans une teinture d'iode officinale. On commence par diluer 200 fois la teinture d'iode (trop concentrée pour une étude spectrophotométrique directe). La solution aqueuse obtenue à l'issue de cette dilution est appelée solution S. Par ailleurs, on dispose d'un ensemble de solutions aqueuses de diiode notées Di (D1, D2, etc) de concentrations connues toutes différentes. Ces solutions ont des colorations proches

couleur absorbée. 2,0 Absorbance A 1,5 680 nm 58 40 0n m ma ge n ta λmax = 350 nm 1,0 rouge 0n m n jau 0,5 e λ (nm) 0 54 47 u ble m 0n ver t 0n m 300 cyan 500 nm Le spectrophotomètre Il est basé sur l’absorption de la lumière par une solution transparente contenant des espèces colorées (ou tout au moins absorbant dans l’UV ou dans l’IR). Il permet de mesurer une grandeur A appelée absorbance, positive, qui peut être

expérimentale des courbes cinétiques et définitions des vitesses Facteurs cinétiques Réactions chimiques avec ordre et sans ordre La vitesse d’une réaction chimique II Le facteur cinétique température, loi d’Arrhenius III Le facteur cinétique concentration, détermination expérimentale de l’ordre d’une réaction chimique 1) 2) 3) 4) Deux situations initiales particulières La méthode différentielle La méthode intégrale La méthode des temps de demi-réaction IV Introduction à la cinétique

transforme la prothrombine et thrombine. Elle permet la coagulation du sang. On mesure ensuite directement l'activité grâce à un spectrophotomètre. Cet appareil mesure la densité optique. L'absorbance d'une solution sera proportionnelle à la concentration de la substance en solution, à condition de se placer à la longueur d'onde à laquelle cette substance absorbe les rayons lumineux ( pour déterminer le pic de prothrombine : 280nm). IV. Résultats 1) Précipitation au Bacl2 Graphique n°1 :

électroniques : ultraviolet et visible c) Les spectroscopies vibrationnelles d) Les spectroscopies rotationnelles e) Les spectroscopies magnétiques ou de spin f) Spectrométrie de masse 4) LOI DE BEER-LAMBERT a) Démonstration et énoncé b) Additivité des absorbances c) Limites 5) SPECTROPHOTOMETRE a) Eléments constitutifs b) Un exemple : spectrophotomètre ultraviolet-visible c) Sources d) Transparence des supports 6) ALLURE DU SPECTRE page 8 page 9 page 10 page 13 page 14 page 17 SPECTROSCOPIE