Chromatographie préparative

premier brevet, déposé aux USA remonte à 1931 et porte sur la purification d'huiles lubrifiantes par extraction par le CO2 supercritique. En 1958, l'idée d'utiliser les fluides supercritiques comme phase mobile en chromatographie est proposé par LOVELOCK. Le terme de chromatographie en phase fluide supercritique est employée pour la première fois par SIE et RIJINDERS. L'utilisation de fluides supercritiques est assez récente (fin des années 1970 pour l'utilisation industriel), et seul le CO2

hydrophiles ne seront pas récupérés en totalité séparation chromatographie en phase gazeuse CPG séparation en fonction du Tm un support solide : la phase stationnaire hydrophobe le gaz = le vecteur qui transporte les lipides sur le support un système de détection qui identifie les molécules et les quantifie Chromatographie d'absorption CCM chromatographie sur couche mince = phase stationnaire deux phases :

Enzymologie : Calculs Formules Vi = k2 [Et] (en phase stationnaire) Vm [S] V = ----------Km + [S] Présence d’un inhibiteur compétitif : K’m = Km (1+ [I]/Ki) Présence d’un inhibiteur non compétitif : V’m = Vm /(1+[I]/Ki) UI = µmol substrat/min Katal = mol substrat/sec AMS = mol substrat / (mol d’enz x sec) = k2 AS = AE / prot (mg) Facteur de purification = ASf/ASi → attention aux unités !!! → attention aux dilutions !!! AEf = AEi x Vi/Vf (Vi/Vf = facteur de dilution ex : dilution 1/50)

refroidissement, on ajoute de l’eau froide dans le contenu du ballon : un solide apparaît. Ce solide subit une purification puis il est récupéré par filtration. 3ème étape : identification. Pour identifier le produit formé on réalise une chromatographie sur couche mince (CCM) avec trois dépôts : dépôt A : une solution d’aspirine pure ; hC   H   dépôt B : une solution obtenue à partir des cristaux ; dépôt C : une solution d’acide salicylique pur. Après révélation, on obtient

1 LA LACTATE DESHYDROGENASE: PURIHCATION PARTIELLE PAR CHROMATOGRAPHIE D'AFFINITÉ La lactate deshydrogénase catalyse la réaction: L lactate + NAD+ < - > pyruvate + NADH +H+ La lactate deshydrogénase (LDH) est un tétramère constitué de quatre sous-unités de 35 kDa. Chez les mammifères deux types différents de sous-unité existent, le type* M (pour muscle) et le type H (pour heart), ce qui correspond à cinq formes d' isoenzymes tétramériques: MH3, H4 M4, M3H, Bien que ces formes

2010, le réseau prend les rênes du service de régional de la protection des végétaux de Loos-en-Gohelle, il intègre le réseau. (IPL santé, environnement durables Nord) Mikhail Tsvet invente la chromatographie en 1901 durant ses recherches sur les pigments végétaux. Il utilisait la chromatographie sur colonne avec du carbonate de calcium comme adsorbant et un mélange d'éthanol comme éluant pour séparer la chlorophylle et les caroténoïdes. La méthode est décrite le 30 décembre 1901 lors du Onzième

Neuro-pathologies » III. Matériels et méthodes 1. Matériels 2. Méthodes a. Sérum b. Pattes c. Dosage de protéines totales par la méthode de Bradford en plaque enzyme linked immunosorbent assay (E.L.I.S.A) d. Dosage de la CgA par la méthode ELISA e. Chromatographie liquide à haute performance en phase inverse (CLHP) f. Le principe du séquençage selon le principe d’Edman IV. Résultats 1. Bradford 2. CGA-E.L.I.S.A 3. HPLC 4. Séquenceur V. Conclusion scientifique VI. Conclusion personnelle VII. Annexes I.

PARLONS D’INVENTIONS …N°1 : LA CHROMATOGRAPHIE Quand ? Qui ? Quoi ? 1906 Mikhaïl Semionovitch Tsvet Licence Commons Creative – Free – Solène Ballois Mikhaïl S.Tsvet (russe – 1872/1919) est un botaniste, qui a permis de faire un bon dans la science car il a créé la chromatographie, Cette invention est une méthode physico-chimique qui permet de séparer les biomolécules entre elles et de les identifier. PARLONS D’INVENTIONS…N°2 : L’ÉLECTROPHORÈSE Quand ? Qui ? Quoi

INTRODUCTION Les conservateurs sont utilisés dans l’industrie alimentaire car ils prolongent la durée de conservation des denrées alimentaires en les protégeant des altérations dues aux microorganismes. Le but de ce TP est donc de doser deux conservateurs que l’on trouve usuellement dans des boissons de type soda : l’acide sorbique, qui a une action antifongique et l’acide benzoïque qui est supposé cancérigène. L’acide sorbique est autorisé jusqu’à 300mg/L et l’acide benzoïque jusqu’à 150mg/L

des écrans et filtres solaires. - Pour les antisudoraux, la mesure d'activité consiste à peser un tampon absorbant placé sous les aisselles. L'augmentation de poids traduit l'importance du flux sudoral. - Pour les déodorants, on utilise la chromatographie en phase gazeuse afin d'identifier et de doser les constituants volatils et odoriférants résultant de la transpiration. 2. Les limites des mesures instrumentales Les mesures instrumentales simplifient et aident l'expérimentateur, elles