Chromatographie préparative

mesure de sa température de fusion : si le produit ne fond pas à la température attendue soit ce n’est pas l’espèce chimique attendue soit il n’est pas pur. CCM (Chromatographie sur Couche Mince) : technique de séparation et d’identification d’espèces chimiques : l’éluant en montant le long de la phase stationnaire (plaque à chromatographie) entraîne avec lui les différentes espèces chimiques. Chaque espèce chimique va se lier plus ou moins bien avec l’éluant et donc migrer à une hauteur plus ou moins

spectres d'absorption. La spectrométrie UV nous a permis de fixer une longueur d'onde d'absorbance maximale pour notre analyse en HPLC. La chromatographie liquide haute performance (HPLC), est également une technique d'analyse très employée. Il existe plusieurs type s de chromatographie HPLC, lors de ce TP nous étudierons plus précisément la chromatographie de partage sur phase inversée. Lors de ce TP nous avons couplés ces deux procédés. I- La spectrométrie UV 1- Principe. Une lumière polychromatique

Maxime 2014/2015 SIMONATA Adrien Compte rendu TP : La lactate déshydrogénase : purification partielle par chromatographie d’affinité Différentes entreprise utilisent de nombreuses protéines dans divers domaines tels que la cosmétiques, la production de facteurs de croissance, l’agronomie... A l’origine une protéine n’est jamais seul dans l’organisme dont elle est

flamme, avec plus de sensibilité. La gestion automatique des brûleurs et des gaz permet d'assurer la qualité des mesures et une sécurité maximale. HPLC : La chromatographie permet la séparation ou la purification d’un ou de plusieurs composés d’un mélange en vue de leur identification et de leur quantification. La chromatographie en phase liquide a permis de réaliser des analyses qui n’étaient auparavant pas possible avec les techniques sur couche mince ou en phase gazeuse. FTIR : La spectrophotomètre

opératoire 4.8 Caractéristiques de la méthode HPLC CONCLUSION ANNEXES BIBLIOGRAPHIE INTRODUCTION Les méthodes HPLC représentent l’outil de séparation chromatographique le plus courant (à l’échelle analytique ou préparative). La transition entre la chromatographique en colonne et l’HPLC s’est faite grâce à la possibilité de fabriquer des particules de très faible taille (3 - 10 µm) et de granulométrie homogène, qui permettait de réaliser des colonnes très efficaces

en présence de standard interne. L’adsorption est effectuée à 60°C pendant 30 minutes. Les composés organiques adsorbés sont désorbés thermiquement pendant 3 minutes dans l’injecteur du chromatographe à 260 °C. Après désorption, l’analyse par chromatographie gazeuse est effectuée sur colonne capillaire de faible polarité avec une détection par MS/MS (spectrométrie de masse en tandem). L’importante masse de données analytiques obtenues ont ensuite été traitées par techniques statistiques et notamment

faible 4. Pourquoi verse-t-on le mélange dans une solution saturée de chlorure de sodium ? 3e étape : caractérisation de l’espèce chimique synthétisée Pour caractériser l’ester obtenu, on réalise une chromatographie sur couche mince. Sur une plaque à chromatographie, on réalise la chromatographie de l’alcool isoamylique (dépôt A), de l’acétate d’isoamyle (dépôt B), de l’acide acétique (dépôt C), de la phase organique obtenue à la fin de la synthèse ci-dessus (dépôt D) et d’une essence de banane

qualifier et de quantifier la protéine majoritaire dans le blanc d'œuf : le lysozyme. Pour cela, il est tout d'abord nécessaire de la purifier à l'aide d'une chromatographie échangeuse d'ions. Ainsi, on pourra mesurer l'activité enzymatique et doser les protéines présentes. PRINCIPE Chromatographie échangeuse d'ions La chromatographie est une méthode d'analyse physico-chimique de séparation. Les constituants d'un mélange se séparent le long d'une phase stationnaire par entraînement d'une

utilise comme système d’expression E.coli (souche JM109) transformé par le plasmide pGEX-2T dans lequel on a inséré le gène de l’IDH. L’IDH recombinante exprimée est en fusion avec la glutathion-S-transférase (GST) à des fins de purification par chromatographie d’affinité sur une colonne glutathione sepharose 4B. L’IDH peut être étudiée et dosée après clivage de la protéine de fusion par la thrombine. II- Principes III- Interprétations des résultats Culture On réalise 30 mL de préculture

14 - LE REDRESSEMENT Objectifs : - connaître le montage redressement monoalternance et la forme de la tension fournie par ce montage ; - connaître le montage redressement bialternance et la forme de la tension fournie par ce montage ; - connaître le filtrage par condensateur pour ces deux montages. Travail à effectuer A K R u' A) L'utilisation la plus fréquente de la diode au silicium se situe dans le domaine du redressement. Le redressement est une opération qui consiste à transformer