EDTA

Methodes d�fetude Methodes d�fetude 188/207 Biologie Moleculaire - Prs C. Housset et A. Raisonnier 2009 - 2010 14.1 Extraction et purification du DNA BM 15 . L�facide desoxyribonucleique est extrait a partir des lymphocytes d�fune prise de sang sur EDTA (anticoagulant chelateur du Calcium). . On separe les lymphocytes des autres cellules sanguinbes par un gradient de densite, puis on les lave avant de les centrifuger en un culot de lymphocytes. . On redissous ce culot dans un tampon et on pratique

+ ++++++++++++++ H 2O (& O2) + H H 2O Cl – H 2O cathode H + OH + – anode H 2O (& H2) – OH H 2O 15 min séparation de cations colonne IC-Pak (Soc. Waters) 150 x 3,9 mm détection : conductivité élution : 0,1 M EDTA/3 mM HNO3 débit 1 mL/min Cl – M + OH + H 2O – © Dunod – La photocopie non autorisée est un délit vers le détecteur membrane perméable aux anions Figure 4.10 Principe de fonctionnement d’un suppresseur à membrane et d’un

globules rouges peut indiquer la présence d’un hemangiosarcome. Cet examen est donc diagnostique de certaines maladies infectieuses, lymphosarcomes, traumatisme avec hémorragie, anémie ou empoisonnement. Le prélèvement sanguin est réalisé sur tube EDTA (tube violet). 1.2. Examens biochimiques Ils vont permettre de révéler la présence de troubles métaboliques : hypoglycémie, hypocalcémie, hypomagnésémie, affections hépatiques ou rénales par dosage d’enzymes spécifiques. Le dosage de l’ammoniac et

chlorhydrique, acide tartrique, acide sulfurique), des agents alcalinisants (ex : hydroxyde de sodium, trométamol) ou des tampons (ex : phospate, citrate). Les préparations liquides contiennent également des agents isotonisant (ex : NaCl) et complexant (ex : EDTA). Les récipients multi-doses peuvent également contenir un conservateur antimicrobien (ex : parabens, chlorure de benzalkonium). Enfin, les préparations peuvent se présenter sous forme concentrée de type liquide ou poudre qui devront être diluées ou

Dictyostelium discoideum pour les PCR : 107 cellules sont lavées en tampon 12mM NaK/Pi (1,66 g/L de NaH2PO4, pH ajusté à 6,1 par ajout de KOH) puis reprises dans 100µl d’eau et 100µl de tampon de lyse 2X (concentration finale 50mM Tris-HCl pH 7,5, 50mM EDTA pH 7,2, 3% SDS, 1% β-mercapto-éthanol). La lyse cellulaire s’effectue dans un premier temps au micro-onde (15,10 et 5 secondes à la puissance maximale) puis dans un second temps à 75°C pendant 10mn après ajout de 200µl de tampon de lyse 1X. On ajoute

existe plus de 200 000 espèces) et de leurs propriétés dépolluantes (accumulation, dégradation) ainsi que de la mise au point et l’optimisation des conditions de croissance et de décontamination (adjuvants, nutriments, fertilisation, agents chélateurs (EDTA), etc.), c’est-à-dire les conditions de biostimulation. Ainsi par exemple, les travaux les plus récents publiés dans les derniers numéros de International Journal of Phytoremediation (2002-2004) décrivent majoritairement l’identification et les propriétés

prolongé  * Certaines intoxications Hémoglobine plasmatique Conditions de prélèvement Prélèvement de sang veineux (en général au pli du coude), avec garrot enlevé le plus rapidement possible. Le tube de prélèvement contient un agent anticoagulant (EDTA). Intérêt du dosage L'hémoglobine est le pigment présent normalement dans les globules rouges. Sa présence dans la fraction plasmatique du sang permet de diagnostiquer une hémolyse intra-vasculaire c'est-à-dire une destruction anormale des globules

(pyrethroid ester insecticide / decis) Dérivé du chlorobenzène Diammonium phosphate N-(3,4-Dichlorophenyl) propanamide Dichromate de potassium Dichromates Di-isobuthyl kétone Diméthyl-thiocarbamyle Dioxyde de carbone Dipyridyl Eau oxygéné (H2O2) EDTA Étain (Sn) Ether Ether de pétrole Fenitrothion (phenyl organothiophosphate) Fenthion Fer Fréon Fuchsine Gel de silice Halogénures d’alkyle Hexane Hydrazine Hydroxyde de calcium Hydroxyde de potassium Hydroxyde de sodium (soude) Hypochlorite

(hématies): cellule anucléée, ronde et HÉMOGRAMME PHYSIOLOGIQUE = Σ de mesures, qualitatives et quantitatives, précisant le nombre et la qualité des éléments figurés du sang ■ CONDITION: prélèvement de sang veineux, sur tube anticoagulé (citraté, EDTA) ■ MESURE QUANTITATIVE = FORMULE NUMÉRATION SANGUINE 1- le nombre de cellules circulantes (GR, réticulocytes, GB, plaquettes) via la cellule de MALASSEZ ou par méthodes enzymatiques 2- le taux d'Hb après lyse, par spectrophotométrie 3- l'hématocrite

(herbicides totaux) Parathion (insecticide volatile) 149 - Penicillines et dérivés (sauf oxacilline et dérivés, et Méthicilline) Pentachlorphenol (insecticide) Phénacétine (analgésique) Phénytoïne (EpanutinE, DiphantoïneE, ...) Plomb complexé (EDTA, penicillamine, citrate, ...) Polymyxine B Procaïnamide (PronestylE) Produits de contraste radiologiques (Iodine, ...) Ranitidine (ZantacE) Streptomycine (DicastreptonE) Strontium (isotope radioactif de longue 1/2 vie (28 ans) libéré par la bombe atomique)