Gelose

et normes : Le test de base est effectuer sur 2h , les nouveaux procédés permettent une mesure en 1h voir même 30min. Pour la 1ère heure : gélose BromoCrésol Pourpre (BCP) (annexe 1) -cytologie positive (plus de 20 000 leucocytes et/ou présence de germes a l’état frais) => gélose chromogène URI 4 (annexe 2 ) Pour les femmes enceintes, on rajoutera une gélose au sang + ANC (annexe 3) pour la recherche de Streptococcus agalacticae ( groupe B) responsable d’infection néo-natale. 2-4-2 Coprologie :

des antiseptiques et désinfectants chimiquesN : Nombre VRB : Gélose lactose biliée au cristal violet et rouge neutreXLD : Xylose-Lysine-DésoxycholateUFC : Unité Formant ColonieMl : Millilitre Sab : SabouraudH : Heure RODAC: Replicate Organism and CountingG: Gramme Min : MinuteUI : Unité internationaleDGAT : Dénombrement des germes aérobies totauxDMLT : Dénombrement des moisissures et levures totauxTSA : Gélose tryptone sojaVRBG : Gélose lactose biliée au cristal violet et rouge neutreThio : ThioglycolateListe

identifier une espèce bactérienne de façon convenable, il faut faire des tests ou des expériences dessus. Il est souvent utile d’avoir une quantité importante de bactéries. Pour cela, on multiplie la souche en réalisant des ensemencements sur une gélose ou dans un milieu liquide adapté. Nous allons voir les principaux types d’ensemencements que nous réalisons au laboratoire : ensemencement d’un bouillon isolement par épuisement numération par étalement manuel ou automatique tapis bactérien

voit que lorsqu’on place un bloc de gélose entre le sommet du coléoptile décapité et le reste du coléoptile, le coléoptile s’oriente vers la lumière. Or, on sait que la gélose laisse passer les molécules de petites taille solubles dans l’eau. On en déduit que le sommet du coléoptile produit une molécule hydrosoluble permettant au coléoptile de se courber quelques centimètres en dessous et de s’orienter vers la lumière. - Frits Went : On voit que le bloc de gélose sur lequel a été placé le sommet

proportions. Pour cela on s'intéresse à la formation de complexes immuns (complexe spécifique antigène-anticorps). L'utilisation de gélose permet une migration rapide des molécules antigéniques, ce qui facilite ainsi la formation et l'observation de tels complexes. La formation des complexes immuns selon cette technique se réalise sur une plaque recouverte d'une gélose, de hauteur constante sur toute la surface de la plaque et à laquelle est mélangé un sérum contenant des anticorps anti-antigène

par ensemencement d'une quantité connue d'urine étalée au râteau sur le milieu gélosé en boîte de Pétri, avec une anse calibrée (1 microlitre). Après 24h d'incubation à l'étuve à 37° C, chaque bactérie ou amas de bactéries présent dans l'urine donne naissance à une colonie visible à l'œil nu (unité formant colonie UFC). Le nombre de bactéries par millilitre est apprécié en comptant le nombre d'UFC sur la gélose, et en rapportant au volume d'urine ensemencé. 6. Identification

c’est-à-dire qu’il y a eu formation de colonies → Notre bouillon a été ensemencer donc contaminer  Ensemencement sur gélose en boite de pétri : Technique des quadrants : Résultat : Après incubation, on remarque formation de colonie sur toute la boite, mais dans le quadrant 4 les colonies sont isolées à l’inverse du premier Ensemencement sur gélose inclinée : Ensemencer une gélose inclinée à partir d’une culture en milieu liquide : RESULTAT : Après incubation on remarque la formation de

manque de flore bactériennes ne permettant pas le développement des bactéries pendant la période d’ouverture. Nous avons commencé par rechercher les milieux adéquats pour la culture des bactéries présentes dans le lait. Au final nous avons trouvé la gélose PCA. Suites aux recherches menées sur internet, nous avons trouvé un protocole de mise en évidence de la présence de bactéries dans du lait avec du bleue de méthylène que nous avons par la suite modifié pour l’expérience. Pour le PTA nous avons diversifié

développer en présence ou en absence totale de l'oxygéne. elle ne se développe que sous une certaine concentration on O2 la bactérie est dite 'micro-aérophile' Causes d'erreurs : - gélose mal régénérée - gélose ensemencée trop chaude - présence d’eau à la surface de la gélose - lecture difficile si gélose disloquée

inorganique (acides aminés, bases azotés, digestion de protéine animale ou végétale appelé hydrolysat, extrait de levure) Source d’eau Autre composant possible : Facteurs de croissance (acides aminés spécifique à la bactérie du milieu, vitamines) Gélose si nécessiter de couler sur boite de Pétri. Environnement à réguler : Incubation à température précise sur une durée de temps précise et limitée. Le pH (neutre pour beaucoup de bactéries) à réguler grâce à solutions tampons. Composition en gaz dans