Lambert Lombard

8/Fonctionnement d’un spectrophotomètre L'absorbance sert à mesurer la capacité d'un milieu donné à absorber une lumière qui le traverse. Elle dépend essentiellement de la longueur d’onde de cette lumière. L'absorbance est donc mesurée expérimentalement à l'aide d'un spectrophotomètre. Un spectrophotomètre permet de mesurer la lumière absorbée par une solution à une certaine longueur d’onde donnée. Grâce à cela, on peut donc en déduire la concentration. C : Concentration Massique C= m/

émergente. Par définition : La transmission T = I / I0. Souvent exprimée en %, elle mesure la transmission de la solution. L'absorbance est A = - log T. Souvent appelée densité optique (d.o.), elle mesure l'absorption de la solution. b) Loi de Beer-Lambert A la longueur d’onde λ, l’absorbance Aλ est proportionnelle à l’épaisseur l (en cm) traversée et à la concentration c de la substance absorbante. Aλ = ε λ . l . c ε est le coefficient d’absorption molaire. Il dépend de λ et de la substance absorbante

Classe de TS TP de Chimie N° 3 ABSORBANCE ET CINETIQUE CHIMIQUE Objectifs : 1- Faire le suivi d'une réaction chimique par spectrophotométrie 2- Passer de l'absorbance d'une solution à la concentration d'une espèce (loi de Beer – Lambert) 3- Déterminer graphiquement la vitesse d'une réaction à partir de la courbe de l'absorbance en fonction du temps 4- Etudier l'influence de la concentration initiale des réactifs sur la vitesse d'une réaction 1. Solutions utilisées • Solution S1

Elaboration d’un nouvel outil pour suivre l’évolution d’une transformation chimique : le tableau d’avancement ou d’évolution d’un système chimique. Type d’activité : - Démarche scientifique Activité expérimentale Pré- requis : - Loi de Beer-Lambert Notions et contenus: Réaction chimique : réactif limitant, stœchiométrie, notion d’avancement.  Compétences spécifiques à cette activité : Identifier le réactif limitant, décrire quantitativement l’état final d’un système chimique. Interpréter

absorbée par une substance colorée, grandeur appelée absorbance et notée A. L’expérience montre que A dépend de la concentration de la substance qui absorbe la lumière et de la longueur d’onde  de la lumière absorbée. 1. Enoncez la loi de Beer-Lambert. 2. A partir du spectre (ci-dessous) de la solution du complexe [Fe(SCN)]2+, justifiez l’emploi d’une source de lumière bleue dans le spectrophotomètre. A 400 500 600 700 λ (nm) Bac blanc Lyautey 2003 Dosage de l’élément fer dans

l’enzyme = (672/2,1.10-8)x1 = 3,18.1010 UI.mol-1.= (1,12 10-5/2,1.10-8)x1 = 530 Kat.mol-1 Correction exercice 2: La vitesse est suivie par spectrophotométrie, ainsi pour calculer la vitesse de disparition du substrat on va utiliser la loi de Beer-Lambert : Abs = ε.l.c, ici seul le produit de la réaction absorbe donc Abs = ε.l.[P] et la variation de concentration de P est ∆Abs = ε.l.∆[P] ∆[P] = ∆Abs/ ε.l = 0,6/ 5000x1 = 1,2 10-4 mol.L-1 = 120 µmol.L-1 Le milieu réactionnel a un volume final de 3 +

soluté apporté en chlorure de sodium dans un sérum physiologique. La conductivité du sérum physiologique est σsérum = 0,90 mS.cm-1. 1. Méthode graphique 2. Méthode analytique Remarque : Correspondance entre loi de Beer-Lambert et loi de Kohlrausch Loi de Beer-Lambert : A= n Loi de Kohlrausch : σ= n i [Xi ] i 1 k i [Xi ] i 1 A : absorbance de la solution (sans unité) [Xi] : concentration molaire d’‛une espèce colorée en solution (en mol.L-1) ki : coefficient de proportionnalité

| 13 | 13,5 | 14 | 14,5 | 15 | | Absorbance à 415nm | 0.523 | 0.534 | 0.544 | 0.554 | 0.563 | 0.572 | 0.580 | | Graphique (annexe 1) Calculs D’après la loi de Beer-Lambert A = ε . l . C Avec A : Absorbance (sans unité) ε : coefficient d’extinction molaire (en L.mol-1.cm-1) l : longueur de la cuve (en cm) C : concentration de la solution (en mol/L) Alors sachant que dans notre situation on détermine l’absorbance

1°S Observer –Couleurs et images TP 8 : Dosage spectrophotométrique  A l’aide d’une pipette graduée, préparer dans différents tubes à essais cinq solutions à partir d’une solution S1 de bleu brillant de concentration molaire c1 = 1,0.10-5 mol.L-1 ; Tubes à essai 1 2 3 4 5 Volume V de solution S1 (mL) 2 4 6 8 10 Volume V’ d’eau distillée (mL) 8 6 4 2 0  Dans une fiole jaugée de 100 ml, préparer une solution S2 de sirop de curaçao dilué dix fois ;  Enregistrer les spectres d’absorption des

absorption de longueur d’onde et désexcitation par réémission de longueur d’onde ou chaleur. La loi d'absorption en absorption atomique L'intensité de l'absorption dépend directement du nombre de particules absorbant la lumière selon la loi de Beer Lambert selon laquelle l'absorbance est proportionelle au coefficient d'absorption spécifique a, au trajet optique b et à la concentration c. A = abc où A = log Io/I. I = intensité après absorption par les atomes Io = intensité initiale de la source lumineuse