Le Tampon

Ethernet c. Réalisation du poste Zone de Contact d. Réalisation du poste Dégraisseur / Dessableur e. Essais V. Réalisation IHM a. Choix du matériel b. Configuration du programme c. Réalisation du poste Eaux Brutes d. Réalisation du poste Bassin Tampon e. Essais (simulation) VI. Réalisation WIT a. Choix du matériel b. Configuration du WIT c. Exemple de création d’une ressource pour le compteur d. Exemple de création d’une plage d’adresse e. Essais ANNEXES (IHM, visite du site) Projet : Station

solution de tampon phosphate : H2PO4- HPO4 - - + H+ de pKA = 6,8, d’osmolarité totale en phosphate égale à 30 mosmol.l-1 et de pH = 7,4. 1) Calculer (H2PO4-) et (HPO4 - -) 2) A 200 ml de solution, on ajoute 0,8 mmol d’ions OH-. Calculer le pH final. 3) Calculer le pouvoir tampon 4) Combien de moles d’H+ faut-il ajouter à 1 litre du tampon pour que le pH change d’1 unité ? Quelle est alors la valeur du pH ? EXERCICE 3 Soit une solution de tampon bicarbonate

avec de l’eau distillée et ajuster le pH à 8. Tampon TE Prélever 2,5 ml de Tris HCL pH8 10 mM et 0,5 ml d’EDTA 1 mM et compléter le volume avec de l’eau distillée à 250 ml Solution 1 Prelever 25 ml et compléter à l’aide de l’eau distillé à 250 ml Tampon CPE 2X Masse à prélever = Masse molaire x Volume x Concentration Prélever 0,84g d’acide citrique 3,22 g de Na2HPO4 et 4ml d’ EDTA et compléter le volume à 50ml avec de l’eau distillée. Tampon CPES Prélever 0,17 g d’acide citrique ; 0,64

- catalyseur TEMED - tampon Tris HCl 1,5M pH 8,8 - APS à 10% - tampon Tris HCl 0,5 M pH 6,8 -SDS 20% Solutions mères pour préparer le gel -mix acrylamide à 22% -catalyseur DAPN - ferricyanure de potassium 0,001% -APS 10% - tampon électrophorèse ND 5X pH 9,1 Solutions

(avec le tampon A) , tandis que celles ayant une affinité y resteront attachées. Ensuite, quand toutes les molécules sans affinité auront été complètement éliminées, on pourra procéder à la désorption des molécules restées attachées au ligand. Ceci se fait en exposant le complexe résine-molécules spécifiques à des conditions où l'interaction ligand-molécule spécifique est moins stable. Généralement on modifie la concentration du solvant pour diminuer l'affinité (on utilisera ici le tampon B). Ces

enzymes de restriction Eco RI et Hind III. Elle aura pour effet la linéarisation du plasmide Blue Script d'une part, et d'autre part la fragmentation en séquences de plus petites tailles du phage lambda. A ces enzymes de restriction sera ajouté un tampon de digestion contenant des co-enzymes dont l'utilisation va aider à la conservation de l'activité des enzymes de restriction. Suite à la digestion enzymatique du phage lambda on obtient théoriquement 13 fragments dont les tailles sont répertoriées

flacons de culture en présence d’un milieu RPMI 1640 (Invitrogen). Ce milieu est complémenté par : * 1 % de pyruvate de sodium : c’est la source de pyruvate qui sera ensuite utilisé dans le cycle de Krebs par exemple * 1 % d’HEPES : permet de tamponner le milieu de culture * 10 % de sérum de veau fœtal décomplémenté (1h, 60°C) (SVF, Invitrogen) : contient les éléments nécessaires à la cellule * Antibiotiques permettant d’éviter une prolifération microbienne 100 μL/mL de streptomycine (Invitrogen)

l’enzyme en l’absence et en présence d’un effecteur chimique. de déterminer l’influence de la concentration en enzyme sur Vi. 2. Conditions matérielles En plus du matériel courant du laboratoire, vous disposez : 2.1 Réactifs et solutions. Tampon acétate pH 4.7 à 0.1 mol.L-1 5 mL AgNO3 à 2 10-5 mol.L-1 dans Tp éthanoate pH 4.7 1 mL Sucre inverti 5 mmol/L 5 mL Saccharose 360 mmol/L 20 mL 3.5DNS en flacons individuels ( Xn, C ) 10 mL  fructosidase non diluée 0.5 mL Glace pour

équilibrée avec le tampon de chromatographie pH 4,2). - Tampon acétate 0,1 mol.L-1 pH 4,2 (mélanger 36,8 mL de A et 13,2 mL de B. Compléter à 100 mL. Ajuster le pH si nécessaire. Solution A : CH3COOH 0,2 mol.L-1(12 g.L-1). Solution B : CH3COONa 0,2 mol.L-1 (16,4 g.L-1)) - Tampon acétate 4 mol.L-1 pH 5,5 (CH3COOH glacial 10 mL + CH3COONa 54,4 g Dissoudre le mélange dans un peu d'eau à chaud. Compléter à 100 mL. Ajuster le pH si nécessaire.) - Tampon acétate 0,5

Ceci est dans le but, non seulement de déterminer sa longueur d’onde optimale mais aussi pour établir une courbe standard qui servira de référence afin de déterminer la concentration d’inconnus par la suite. Protocole : 1- Mettre 500 µl du tampon acétate de sodium à 100 mM pH 4,5. 2- À partir de la solution mère d’ONP 10mM, préparez des solutions contenant différentes quantités d’ONP. 3- Compléter à 1ml avec H2O. 4- Ajouter 2ml de solution stop (Na2CO3) 5- Mesurer