Ligase

des brins coupe liaisons phosphodiesters. Et capable de les reformer = enzyme relaxante de l’ADN. Ligase : assure dernières laisons phosphodiesters Déroulement : Rupture liaisons H par hélicase donc formation de l’œil de réplication Synthèse amorce ARN par ADN polymérase alpha ADN polymérase delta qui fab nouveaux brins  RNases dégrade ARN ADN polymérase alpha bouche les trous ligase Forme les dernieres liaisons phosphodiester Processus bio extrémemnt fidele, fait très peu d’erreurs

avons développées précédemment. Première étape: Tout d’abord, on introduit le gène d’intérêt dans un plasmide (ADN bactérien). Pour cela, on utilise différentes enzymes, notamment la ligase (enzyme permettant l’union de deux molécules) ou une enzyme de restriction qui agit comme la ligase .Sous l’action de la ligase l’ADN est incorporé dans le plasmide lui conférant ainsi de nouvelles caractéristiques. On obtient donc un plasmide génétiquement modifié comprenant le gène d’intérêt. Deuxième étape:

nucléotidique e) Concerne uniquement la chaîne non-codante Pendant la réplication a) La chaîne précoce est synthétisée de façon continue b) Les fragments d’Okazaki sont créés sur les chaînes tardives c) La double hélice d’ADN s’ouvre à l’aide des ligases d) La fourche de réplication se déplace sur le chromosome grâce à l’ADN hélicase e) Fait intervenir l’ARN polymérase L’information génétique dans les cellules eucaryotes peut être transmise par : a) La transcription b) La transduction c) La

5’ → 3’. Okazaki a montré qu’une portion importante de l’ADN nouvellement synthétisé existe sous forme de courts fragments (1000 nucléotides) = fragments d’Okazaki. Fourche de réplication : La jonction des fragments d’Okazaki s’effectue grâce à une ligase qui catalyse la formation d’une liaison phosphodiester entre le 3’- OH à la fin d’une chaîne d’ADN et le 5’P à l’extrémité de l’autre. 3. La réplication de l’ADN nécessite des polymérases hautement processives L’enzyme responsable de la réplication

un plasmide en découpant celui-ci avec l’enzyme de restriction qui a servi à isoler cette séquence : VRAI. Questions à réponses courtes  a. Par quelle technique sépare-t-on des fragements de restriction ? Par électrophorèse. b. A quoi sert l’ADN ligase ? Elle sert à souder deux fragments d’ADN au niveau du squelette sucre-phosphate. c. Pourquoi faut-il dénaturer l’ADN pour l’hybrider avec une sonde ? Pour avoir de l’ADN simple brin dont les bases pourront établir des liaisons hydrogène avec les

de nucléotides). #7 : Lorsque L’ADN polymérase 3 rencontre une amorce déjà synthétisée, elle se détache et laisse sa place à l’ADN polymérase 1. #8 : L’ADN polymérase 1 remplace l’amorce d’ARN par des nucléotides d’ADN. #9 : Une fois terminé, une ligase attache les fragments, qui sont nommés fragments d’Okasaki. #10 : Opérations répétées jusqu’à ce que les 2 nouveaux brins soient synthétisés. Transcription ADN : - Toutes les protéines sont des assemblages d’acide aminés. - La cellule place

Universel 5- Lors de la réplication, les fragments nouvellement synthétisés sont réunis de façon à ce que l’extrémité 5’ de l’un des fragments soit liée à l’extrémité 3’ d’un autre fragment par l’action de : a. L’ADN polymérase b. L’ARN primase c. L’ADN ligase d. L’ADN endonucléase 6- La séquence des bases du brin d’ADN qui a servi de matrice pour la synthèse d’un ARN messager est AGCT. La séquence des bases trouvées dans cet ARN messager est : a. GCTA b. TCGA c. UACG d. UCGA 7- A propos de la chromatine

que sous certaines conditions. Plusieurs produits de gènes sont essentiels pour la croissance des cellules quelque soit les conditions dans lesquelles elles se trouvent :( les gènes codant la RNA polymérase, les protéines ribosomales, la DNA ligase, les hélicases…sont des gènes essentiels). Ainsi, si une cellule a une mutation qui inactive ces gènes essentiels, cette cellule ne peut pas etre isolée à moins que cette mutation n’inactive le gène que dans certaines conditions. Par

sont classées en six principaux groupes, en fonction du type de réaction qu'elles catalysent : 1. oxydo-réductases (E.C.1) ; 2. transférases (E.C.2) ; 3. hydrolases (E.C.3) ; 4. lyases (E.C.4) ; 5. isomérases (E.C.5) ; 6. ligases ou synthétases (E.C.6). Les enzymes sont généralement nommées en additionnant le suffixe -ase au nom de leur substrat, et elles sont classifiées par un système numérique standard. Leur numéro est attribué par l' « Enzyme Commission » (EC) voir

une substance X colorée en bleu. Il est donc facile de voir si b-galactosidase est présente ou non grâce a la coloration bleu. Pour la boite L1, qui contiens du plasmide digéré, un tampon de ligation, de l'adn lambda digéré, de l'eau stérile et la ligase, j'ai obtenue un tapis de cellule. Il devrait n'y avoir que des colonies, qu'elles soient blanches ou bleues. Il y a du avoir un problème au niveau de l'antibiotique qui du être inefficace. On a donc tué aucune cellule, c'est pourquoi elles sont présentes